[发明专利]制备补骨脂素和异补骨脂素或包含它们的提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药提取分离技术领域，具体涉及补骨脂中有效成分补骨脂素和异补骨脂素或者包含它们的提取物的分离制备方法。

背景技术

补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，首见于《开宝本草》，分布于山西、陕西、安徽等地，具有温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻的功效。现代化学研究表明补骨脂主要含有糖苷、香豆素、黄酮、单萜酚类成分，具有抑菌、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫等活性。目前，补骨脂的开发利用受到了药学工作者的重视，补骨脂滴鼻液、补骨脂滴丸、用于治疗白癜风的复方补骨脂酊等均有报道。临床上含补骨脂的中成药应用也相当普遍，如四神丸、生发酊、白癜风胶囊、壮骨关节丸、青蛾丸等。

补骨脂素和异补骨脂素是补骨脂药材中的主要活性成分，《中华人民共和国药典》2010年版一部对补骨脂素和异补骨脂素的总量限度作出明确规定，补骨脂药材中补骨脂素和异补骨脂素的总量不得少于0.70%。补骨脂素与异补骨脂素具有多种药理活性。研究表明，补骨脂素和异补骨脂素能明显提高酪氨酸酶的活性，促进皮肤黑色素合成，能够治疗白癜风等疾病；补骨脂素、异补骨脂素还具有雌激素样活性。另外，补骨脂素还可使血清肌酐浓度明显降低，肾小球滤过率增加，从而加快以肾脏排泄为主要清除途径的药物在体内的清除过程。补骨脂还具有抗癌活性，实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等均有抑制作用。临床应用及现代药理研究结果都表明补骨脂有防治骨质疏松的作用，能够促进骨再生和重建。有报道补骨脂素有望成为治疗前列腺增生的比较理想的药物之一。已有报道，补骨脂素对化疗药物耐药的急性白血病(AL)患者有明确增敏作用。补骨脂素对多种细菌有抑制和杀灭作用，在加黑光和长波紫外线照射下，抗菌谱更广；平碟培养法实验证实补骨脂素及异补骨脂素对某些细菌加小孢子菌、石膏样小孢子菌、红色毛癣菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、乙型链球菌、大肠杆菌、绿脓球菌等均有较好的抵抗作用。

如何快速大量的制备补骨脂素与异补骨脂素是工业生产中密切关注的问题。目前关于补骨脂素和异补骨脂素的制备方法有乙醇等有机溶剂提取法、超临界CO2萃取法、超声法、高速逆流色谱法等。

例如，乙醇等有机溶剂提取法是比较传统的提取方法，将补骨脂药材经醇提取三次，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，得到浸膏，加适量水溶解分散，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩回收溶剂后得到各部分萃取物，利用硅胶柱、凝胶柱等柱层析技术对各部分萃取物进行分离，最后得到补骨脂素和异补骨脂素的单体。然而此法存在着有效成分损失大，周期长、工序多，提取效率不高，产品提取不纯等缺点。

黄芳等在《超临界CO2流体从补骨脂中提取分离补骨脂素、异补骨脂素及脂肪油的工艺研究》中介绍了制备补骨脂素和异补骨脂素的超临界CO2萃取方法。将适量已粉碎的补骨脂生药投人萃取釜，按预定温度、压力萃取，萃取时间为3小时。将萃取所得的油状物静置后析出结晶物，抽滤后得到补骨脂脂肪油和补骨脂素晶体，用石油醚洗涤结晶得到补骨脂素。油层继续加适量石油醚-乙醚(1:3)析晶得到异补骨脂素粗品。此法与传统工艺相比，在得到补骨脂素晶体的同时也获得异补骨脂素粗品，工艺简单，周期短，但是粉碎药材所需时间长，得到纯品量有限。

本领域需要有能够快速和/或大量地制备补骨脂素和异补骨脂素或者包含它们的提取物的方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有制备补骨脂素和异补骨脂素或者包含它们的提取物技术中存在的不足，提供一种能够快速和/或大量地制备补骨脂素和异补骨脂素或者包含它们的提取物的方法。本发明令人意外地发现，利用补骨脂大量存在的补骨脂素和异补骨脂素的糖苷，即补骨脂苷、异补骨脂苷，通过酸水解反应得到补骨脂素和异补骨脂素粗品，经简单处理后得到大量补骨脂素和异补骨脂素纯品。本发明基于以上发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了一种制备补骨脂素和异补骨脂素或者包含它们的提取物的方法，其包括以下步骤：

i)使补骨脂药材用水回流提取，将合并提取液浓缩，得到浓缩液；

ii)向所得浓缩液中加入酸，加热水解；

iii)使水解液在大孔吸附树脂柱上用水洗脱除去杂质，然后用浓度大于50%的乙醇水溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩或者任选地进一步干燥，得到含有补骨脂素和异补骨脂素的提取物；

iv)任选地，使步骤iii)所得提取物在硅胶柱上用有机溶剂进行洗脱，收集补骨脂素流分和异补骨脂素流分，除去溶剂，分别得到补骨脂素和异补骨脂素。