[发明专利]一种β2-微球蛋白检测试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地说涉及一种检测人β2-微球蛋白的检测试剂盒。

背景技术

β2-微球蛋白是由100个氨基酸残基组成的单链多肽低分子蛋白。电泳在β2区，故称β2-微球蛋白。起源于人体间质，上皮细胞和造血系统的正常细胞以及恶性肿瘤细胞均能合成β2-微球蛋白。

β2—微球蛋白相对分子量小，可自由通过肾小球滤过，并仅由肾脏排泄且体内产生速率恒定，不受年龄、性别、机体肌肉组织多少的影响，因此血清β2—微球蛋白是肾损害的早期指标。

血清β2—微球蛋白的升高可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况，而尿液中排出β2—微球蛋白增高，则提示肾小管损害或滤过负荷增加。血β2－微球蛋白升高而尿β2－微球蛋白正常，主要由于肾小球滤过功能下降，常见于急、慢性肾炎，肾功能衰竭等。

血清β2—微球蛋白增高，除因肾小球滤过率降低外，另一个原因是合成增加，见于恶性增生性病变及结缔组织病变，在肿瘤方面，播散性病变较局限的病变中，更易产生血清β2—微球蛋白升高。某些恶性肿瘤（如原发性肝癌、肺癌、骨髓瘤等），自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、溶血性贫血）时，血、尿β2－微球蛋白均升高。

因此，β2－微球蛋白测定在评价肾脏功能、协助诊断和鉴别诊断恶性肿瘤方面有显著作用。

目前已知的测定β2—微球蛋白的方法有免疫扩散法、免疫电泳法、放射免疫法、酶联免疫法。这些方法具有操作繁琐、耗时长、过度浪费资源的缺点，不适于常规检验。

发明内容

本发明的目的是提供一种β2-微球蛋白的检测试剂盒。该试剂盒可直接应用于全自动生化分析仪上，结果准确性强、试剂稳定性好、使用方便、便于大规模推广。

本发明的另一目的是提供上述检测试剂盒的生产制备及使用方法。

为实现上述目的，本发明提供的试剂盒组成为：

试剂R1：缓冲液、聚乙二醇、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白；

试剂R2：缓冲液、结合有β2-微球蛋白单克隆抗体的乳胶粒子、吐温-20、叠氮钠、乙二胺四乙酸钠、牛血清白蛋白。

本发明提供的上述试剂盒的制备方法及操做步骤如下：

（a）按下列比例配制好试剂：

试剂R1：

Tris缓冲液      200-220mmol/L

聚乙二醇        5-10 mmol/L

叠氮钠          1-5 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  1-5mmol/L

牛血清白蛋白    1-5mmol/L；

试剂R2：

Tris缓冲液      200-220mmol/L

结合有β2-微球蛋白单克隆抗体的乳胶粒子   3.5-5%（v/v）

吐温-20         1-5mmol/L

叠氮钠          0.5-3 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  1-5mmol/L

牛血清白蛋白    1-5mmol/L。

（b）将试剂与待测样本按一定比例混合，使其完全反应；

（c）用半/全自动生化分析仪测定吸光度变化值；

（d）根据吸光度变化值计算出样本中β2-微球蛋白的浓度。

具体实施方式

下述实施例是为了更详细的解释本发明，但不应理解为本发明局限于此。

实施例1：

本发明的试剂盒举例是双试剂，其中：

试剂R1：

Tris缓冲液      200mmol/L

聚乙二醇        8 mmol/L

叠氮钠          5 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L；

试剂R2：

Tris缓冲液      200mmol/L

结合有β2-微球蛋白单克隆抗体的乳胶粒子   5%（v/v）

吐温-20         5mmol/L

叠氮钠          3 mmol/L

乙二胺四乙酸钠  5mmol/L

牛血清白蛋白    5mmol/L。

实施例2：试剂盒使用方法

1.试剂准备，试剂为液体双试剂，开瓶即用，其中：

试剂R1：

Tris缓冲液      200mmol/L