[发明专利]一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法

说明书

技术领域

   本发明涉及一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法。

背景技术

农药甲氰菊酯在土壤中大量蓄积会影响农作物、牲畜和人等生物链，会导致土质和产量的下降并影响相应的经济收入。以微生物为主体的生物修复技术可用于降解各种有机污染物，具有高效、安全、无二次污染、费用低等优点，甲氰菊酯农药降解菌可用于降解、去除农药甲氰菊酯残留，能够达到降低去除毒害和提高产量的目的，起到保障食品安全增加社会效益的效果。但是目前的降解菌筛选方法主要是通过采集样本，富集培养，分离纯化，梯度驯化培养，确定降解率等一系列手段得到甲氰菊酯农药降解菌，花费的时间长，工作量大，成本高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种方法简便、耗时短、筛选工作量小的甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法、能克服现有技术的不足。

本发明采用的技术方案：

一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采用以下步骤:

(1)采集样本；

(2)富集培养；

(3)选择培养基培养；

(4)分离纯化；

(5)得到降解菌株，保藏。

所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，采集样本：取采自农药厂废水排放口附近的活性污泥。

所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，富集培养：置于 100 mL基础盐培养基中，基础盐培养基配方：甲氰菊酯：100 mg·L^-1，NaCl ：1.0 g/L，NH₄NO₃：1.0 g/L，K₂HPO₄：1.5 g/L,， KH₂PO₄：0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O：0.1 g/L，Ph=7.0，于 37 ℃，130 r·min^-1摇床培养1d，以 5 mL的接种量转接到基础盐培养基中，共转接3次。

所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，选择培养基培养：取富集液1mL添加到选择培养基中，选择培养基培养配方：甲氰菊酯：600 mg·L^-1，NaCl ：1.0 g/L，NH₄NO₃：1.0 g/L，K₂HPO₄：1.5 g/L,， KH₂PO₄：0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O：0.1 g/L，Ph=7.0，于 30 ℃，130 r·min^-1振荡培养3d。

所述的一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法，分离纯化：吸取0.2mL培养液涂布于加有 100 mg·L^-1甲氰菊酯的基础盐培养基平板，在30℃培养2d，挑取在农药培养基中生长快、菌落规则、传代稳定的单菌落,划线培养3次后转入斜面保存。

本发明的有益效果是：本发明通过采用选择培养基筛选，避免使用传统的梯度驯化培养，大大节省了筛选的时间和工作量，相应地减少了筛选的成本，大大提高了筛选的效率。采用传统传统筛选方案的流程，需要耗时14~66天，工作量大，成本也相应增高。而采用本发明的筛选方案，仅耗时12天，工作量较小，成本也较低。

附图说明：

图1：为本发明采用的技术方案的流程图。

图2 ：为现有传统筛选方案的流程图。

具体实施方式

实施例1：

一种甲氰菊酯农药降解菌的筛选方法， 采用以下步骤:（1）采集样本；（2）富集培养；（3）选择培养基培养；（4）分离纯化；（5）得到降解菌株，保藏。

筛选方法具体步骤为，取采自农药厂废水排放口附近的活性污泥，置于 100 mL的基础盐培养基中，基础盐培养基配方：甲氰菊酯：100 mg·L^-1，NaCl ：1.0 g/L，NH₄NO₃：1.0 g/L，K₂HPO₄：1.5 g/L,， KH₂PO₄：0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O：0.1 g/L，Ph=7.0，于 37 ℃，130 r·min^-1摇床培养1d，以 5 mL的接种量转接到相同的培养基中，共转接3次，取富集液1mL添加到选择培养基中，选择培养基培养配方：甲氰菊酯：600 mg·L^-1，NaCl ：1.0 g/L，NH₄NO₃：1.0 g/L，K₂HPO₄：1.5 g/L,， KH₂PO₄：0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O：0.1 g/L，Ph=7.0，于 30 ℃，130 r·min^-1振荡培养3d，吸取0.2mL培养液涂布于加有 100 mg·L^-1甲氰菊酯的基础盐培养基平板，在30℃培养2d，挑取在农药培养基中生长快、菌落规则、传代稳定的单菌落,划线培养3次后转入斜面保存；将得到降解菌株保藏。