[发明专利]一种高纯度8-苯胺基-1-萘磺酸及其盐的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一类高纯度生化试剂的制备方法，尤其涉及一种高纯度8-苯胺基-1-萘磺酸及其盐的制备方法。

背景技术

目前已知的国产8-苯胺基-1-萘磺酸及其盐类产品不能满足生物技术，尤其是荧光探针、蛋白质染色、血细胞分析等生命科学研究与应用领域的需求。其主要问题在于：1、纯度偏低。用于传统染料中间体的8-苯胺基-1-萘磺酸的工业级产品的纯度通常只有85%～86%左右。2、有害杂质含量过高，尤其是铁、铅、铬、汞、砷、锰、铜等元素含量过高。3、未反应的上游原料残留过多。如苯胺、周位酸，以及其它副反应产生油状杂质（复杂有机物）过多，导致8-苯胺基-1-萘磺酸及其盐类产品的颜色偏深，通常呈墨绿色或深褐色，其水溶液色度也很深，导致在生物技术领域的应用效果不好。另外，现有技术在精制过程中收率很低，而且需要使用乙酸乙酯等溶剂等耗材，生产成本偏高。

发明内容

为解决现有技术中存在的技术问题，发明人在高纯度8-苯胺基-1-萘磺酸及其盐的制备方法方面进行了大量的探索，预料不到地发现，以精制后的周位酸与精制后的苯胺为原料，在精制的硫酸的作用下反应得到的8-苯胺基-1-萘磺酸经纯化后，纯度高，杂质含量少，可满足生物技术领域的应用需求；并且本发明工艺流程简单，成本低廉，对环境污染小。     

 一方面，本发明提供一种高纯度8-苯胺基-1-萘磺酸的制备，包括如下步骤：

原料的精制：将工业级的周位酸用二氯甲烷或低碳醇溶解，重结晶后得到精制的周位酸，精制的周位酸为白色结晶颗粒状，含量大于98%；将工业级的苯胺通过氮气保护下的减压精馏得到精制的苯胺，精制得到的苯胺纯度大于99.9%；将工业级的硫酸通过微波加热至沸腾，再经衬有聚四氟乙烯层的冷凝器冷凝得到精制的硫酸。精制后的周位酸、苯胺和硫酸不仅纯度提高，而且有害杂质含量减少，尤其是铁、铅、铬、汞、砷、锰、铜等元素含量显著减少。

精制的苯胺和精制的周位酸在精制的硫酸存在下发生缩合反应，缩合反应物减压蒸馏得到8-苯胺基-1-萘磺酸的粗品，反应式为：

。

用10%质量百分比的氢氧化钠溶液溶解8-苯胺基-1-萘磺酸的粗品，得到混合溶液，再往混合液中加入中性氧化铝和活性炭，用于脱色、吸附去除金属离子和有机杂质，然后，搅拌两个小时，之后通过过滤材料进行过滤，过滤三次，可去除铁、锰、铜、汞、铅、铬、汞、砷等相应的氢氧化物或碱式盐形态存在的不溶物，最后收集滤液。

将收集到的滤液倒入洁净容器中，边搅拌，边缓慢滴加50%体积百分比的硫酸溶液，然后通过过滤材料进行过滤，收集第一滤渣；再用20%体积百分比的硫酸溶液洗涤第一滤渣，通过过滤材料进行过滤，重复三次，收集得到第二滤渣；再用10%体积百分比的硫酸溶液洗涤第二滤渣，通过过滤材料进行过滤，重复三次，收集得到第三滤渣；依次用50%、20%和10%体积百分比的硫酸溶液洗涤的目的在于逐步降低溶液的pH值，使得不溶性金属盐、有机副产物和原料残留物分步析出并在尾液中滤除。

最后用纯水洗涤第三滤渣，反复抽滤至滤液的pH值约为6～7，收集得到第四滤渣，然后将得到第四滤渣置于真空干燥箱中，45～60℃干燥24～30h，得到精制的8-苯胺基-1-萘磺酸。

本发明的进一步改进是：精制的苯胺和精制的周位酸在精制的硫酸存在下发生缩合反应的温度控制在15～60℃之间，连续反应时间为24～36h。

本发明的进一步改进是：过滤材料包括普通滤纸和0.2nm滤膜，目的在于溶解去除溶于硫酸的有机杂质，如苯胺及其副产物。

本发明的进一步改进是：往8-苯胺基-1-萘磺酸溶液中滴加50%体积百分比的硫酸溶液的速度为0.5～2ml/s并充分搅拌，这样才能把溶于8-苯胺基-1-萘磺酸粗品中的有机杂质，如苯胺及其副产物，以及部分金属离子及其相应的硫酸盐完全溶解并最终去除。

另一方面，本发明还提供高纯度8-苯胺基-1-萘磺酸盐的制备方法，包括如下步骤：