[发明专利]神经分化相关基因BRSK2的siRNA的新用途

说明书

技术领域

本发明属于医药及基因工程领域，提供了神经分化相关基因BRSK2的siRNA的新用途。本发明还涉及了含有siRNA与化疗药物的药物组合物及其应用。 

背景技术

胰腺癌是由胰腺癌上皮恶变形成的恶性肿瘤，虽然其发病率仅排名恶性肿瘤的第13位，但是其致死率却在恶性肿瘤中位列第8位。根据世界卫生组织的统计,全世界每年有216 000多人确诊为胰腺癌。在我国该癌症发病率原很低,但近年也呈现逐年增多的趋势，近年来已经升至第5位。即使现在有化疗、放疗、手术等多种治疗方法，胰腺癌的生存率仍然不到5%。因为在出现初级症状时就已经伴有转移现象，所以被确认为胰腺癌时往往已经是临床晚期。因此只有10%的患者能够接受手术，而辅助疗法基本已经无能为力。造成胰腺癌的死亡率基本上与其发生率持平，五年生存率仅有5%。 

AMP-活性相关激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)是一个高度保守的丝氨酸苏氨酸激酶，当细胞内能量下降时，AMPK经由其上游的激酶激活其催化区域的172位丝氨酸的磷酸化而被活化，因此又被称为能量变化感应器。根据AMPK激酶结构域氨基酸的保守性，Manning等人将BRSK1,BRSK2,AMPK等13个激酶归于AMPK亚家族。BRSK2是由申请人最早克隆出来的一个基因，刚开始认为其只在脑中表达，故起名为脑特异表达激酶2(Brain-specific kinase 2,BRSK2)，后来发现其不仅仅存在于脑里，在胰腺中也有表达。 

BRSK2是申请人利用重要结构域同源筛选策略EST电子克隆技术，首先克隆并提交的新基因。前期对BRSK2的研究主要集中在它们在神经极化、突触形成以及递质释放等过程中起到的应用。小鼠中BRSK2的同源基因被命名为SAD-A以及SAD-B，单突变BRSK2的动物模型表型正常，但是双突变BRSK2的模型动物在出生后两个小时就死亡，解剖发现动物的大脑皮层比正常的要薄得多，并且神经元缺乏轴突以及树突。一个可能的机制是SAD通过磷酸化Tau，引起MAPs与微管蛋白结合不紧密，造成微管蛋白不能正常形成，最终对轴突形成造成影响。另外有研究表明，人的BRSK2是新的突触小泡和活动机制相关蛋白激酶，通过磷酸化其活动区蛋白和小泡引发因子RIM1，达到调节神经递质释放的功能。最新研究表明，除了在神经系统的中心起到调节神经极化、轴突树突形成等起到作用，BRSK2还能特异地定位于肌肉神经节点处，控制神经递质在周围神经系统的释放。 

DNR是一种重要的蒽环类抗癌药物，分子式C27H29NO10，通常称为柔红霉素。中文别名：正定霉素，柔毛霉素，红比霉素，红保霉素，佐柔比星，红比脘。外文名：Daunorubicin,Daunomycin,Daunoblastin,Rubidomycin,Rubomycin,Ondena,Cerubidine.外文缩写：DNR，DRB，DM，F.I.6339,NSC-82151,13057R.P,本发明中也简称为DAU。化学名：（1S，3S）-3-乙酰基-1，2，3，6，11-六氢-3，5，12-三羟基-10-甲氧基-6，11-二氧-1-1萘基-3-氨基-2，3，6-三去氧-a-L来苏六吡喃糖甙。DNR药物为橙红色针状结晶，易溶于水，其水溶液相当稳定，在0℃能保存3周，其活力不变，不溶于氯仿、丙酮、乙醚、苯。是Str.peucetius或Str.coeruleorubidus菌种所产生的抗生素，是从我国河北正定县土壤中得到的放线菌菌株，故亦名正定霉素。 

阿霉素（DOX）分子式为C27H29NO11，分子量543.49，化学名称：(2R,4S)-4-(3-Amino-2,3,6-trideoxy-α-L-lyxo-hexopyranosyloxy)-2-hydroxyacetyl-1,2,3,4-tetrahydro-2,5,12-trihydroxy-7-methoxynaphthacene-6,11-dione。通常为桔红色的冻干粉剂。阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强，抗瘤谱较广，对多种肿瘤均有作用，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用。主要适用于急性白血病，对急性淋巴细胞白血病及粒细胞白血病均有效，主要的毒性反应有，白细胞和血小板减少，不同程度的毛发脱落,心脏毒性，恶心、食欲减退,药物溢出血管外可引起组织溃疡及坏死。 

丝裂霉素,英文名：Mitomycin,分子式：C15H18N4O5,分子量：334.33，CAS号：50-07-7。结构如下：