[发明专利]鬼针草总黄酮的提取方法及其在制备治疗类风湿性关节炎药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及鬼针草总黄酮的提取方法及其在制备治疗类风湿性关节炎药物中的应用，属于医药技术领域。

背景技术

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种不明病因的临床综合征，以慢性多关节炎症为主要表现，目前认为属于系统性自身免疫性疾病。主要特征为慢性、全身性、侵蚀性外周关节滑膜炎，主要侵犯滑膜组织，继而引起关节软骨、周围韧带及骨质的破坏。本病呈全球性分布，我国的患病率为0.32％～0.36%，低于欧美国家白人的1%，是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一。目前RA的治疗主要是：①控制关节及其他组织炎症，缓解症状；②保持关节功能和防止畸形；③修复受损关节以减轻疼痛和恢复功能，尚缺乏根治RA的方案以及预防RA的措施。到目前为止尚无特异性治疗药物，临床上常采用的是控制炎症和抑制机体免疫应答的药物，如泼尼松、氨甲喋呤等，但是，它们在抑制机体免疫应答引起的炎症反应和组织损伤的同时，也抑制了免疫系统的抗感染能力，将由此而产生一系列不良反应。

RA是一种以关节滑膜及关节软骨损害为特征的全身性免疫性疾病，主要表现为对称性、慢性、进行性多关节炎。一旦发病，往往终身罹患，严重影响患者的生活质量。但类风湿性关节炎至今尚无特效疗法，抗炎和免疫疗法是治疗RA的主要手段，但主要是激素和抗代谢等不良反应较多的药物。因此寻找有效的具有免疫调节作用且副作用小的药物，对于类风湿性关节炎的治疗具有重要的意义。在此背景下，人们的目光转向了中医中药。中医药防治类风湿性关节炎的长期临床实践积累给抗类风湿性关节炎的中药研究奠定了坚实的基础，特别是前人对类风湿性关节炎（中医痹症范畴）治疗的理论总结和处方用药经验，为当今中药抗类风湿性关节炎研究提供了线索和捷径。寻找价格便宜和疗效好的中药及其有效成分治疗RA，日渐成为研究的热点。迄今报道对类风湿性关节炎中药有效成分有多糖类、黄酮类、苷类、生物碱类、内酯类、挥发油类及其他。具有疗效确切、安全、副作用少、价格便宜等特点。

《中药大辞典》载鬼针草有清热解毒、祛风除湿、散瘀消肿之功效。我们从鬼针草中提取了活性成分TFB，研究其在治疗类风湿性关节炎中的作用和作用机制。

鬼针草（Bidens bipinnata L.）系菊科鬼针草属一年生草本植物，在我国大多数省区均有分布。鬼针草药用历史悠久，味苦、性平而无毒，具有清热解毒，散瘀消肿等功效。其主要成分有黄酮苷、皂苷、生物碱、挥发油等，民间用于治疗痢疾、腹泻、肝炎、胃痛、关节痛等，现代研究发现鬼针草富含黄酮类化合物，为将其开发成对类风湿性关节炎有治疗作用的有效药物提供非常珍贵的依据。我们提取其有效部位，通过动物实验证实其有显著的抗类风湿性关节炎的作用。

经检索，尚未见关于鬼针草总黄酮治疗类风湿性关节炎的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供鬼针草总黄酮（total flavones of Bidens pilosa L，TFB）的提取方法及其在治疗类风湿性关节炎药物中的应用。

按照本发明提供的技术方案，鬼针草总黄酮的提取方法，其提取工艺步骤为：取鬼针草，用10~14倍鬼针草重量的、质量浓度为70%~90%的乙醇溶解提取2次，每次1h；收集提取液，用大孔吸附树脂HPD10吸附提取液；提取液上样浓度为1~1.5mg·mL^-1，以1~3BV·h^-1的吸附速率进行吸附，上样量以溶质总黄酮计为3~5mg·mL^-1大孔吸附树脂；吸附后先以3~5BV的水水洗去杂质，再用3~5BV质量浓度为70%~90%的乙醇以3~5BV·h^-1的速率进行洗脱；在此条件下进行吸附、洗脱，大孔吸附树脂能够重复使用3~5次；经大孔吸附树脂吸附，质量浓度为70%~90%的乙醇解吸后为鬼针草总黄酮溶液，采用比色法测定鬼针草总黄酮溶液中总黄酮的含量和得率。

所述总黄酮百分含量为60%~80%，得率为3%~6%。

所述鬼针草总黄酮溶液在制备治疗类风湿性关节炎药物中的应用。

所述鬼针草总黄酮溶液制备成治疗类风湿性关节炎药物，即片剂、胶囊剂、冲剂和颗粒。

鬼针草总黄酮的临床推荐剂量为100~400mg/天，口服，一日三次。（80~160mg/kg是大鼠的用药剂量）

将所制备得到的鬼针草总黄酮溶液进行动物实验，结果如下：