[发明专利]基于磷光发光技术的时间分辨荧光检测试剂盒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于磷光发光技术的时间分辨荧光检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：包被有抗原或抗体的磁颗粒、标记有磷光发光材料的抗原或抗体、待测物标准品溶液、洗涤液和微孔板。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述包被有抗原或抗体的磁颗粒，是指磁颗粒通过表面修饰处理生成羧基或氨基中的至少一种活性基团，与抗原或抗体中的氨基酸残基中裸露氨基共价反应形成的复合物。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述标记有磷光发光材料的抗原或抗体，是指带有羧基或氨基的铂/钯卟啉化合物，与抗原或抗体氨基酸残基中的裸露氨基共价反应形成的复合物。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述待测物标准品溶液，是指将待测物标准物质，按照一定的质量体积比或摩尔体积比溶解在基质配方中所得的溶液。所述配制待测物标准品溶液的基质配方为0.05mol/L pH7.2Tris-HCl缓冲液，内含1.5％牛血清白蛋白、10％胎牛血清、0.1％防腐剂Proclin300和0.2％保护剂。

5.一种权利要求1所述试剂盒的制备方法，其特征在于，制备方法包括：制备包被有抗原或抗体的磁颗粒、标记有磷光发光材料的抗原或抗体、待测物标准品溶液和洗涤液。

6.根据权利要求6所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述包被有抗原或抗体的磁颗粒，是将磁颗粒通过表面修饰处理生成羧基或氨基中的至少一种活性基团，与抗原或抗体中的氨基酸残基中裸露氨基共价反应的过程。反应结束后用磷酸盐缓冲液磁分离淋洗3次，2％牛血清白蛋白封闭，离心去除上清液后，用磁颗粒稀释液溶解分散，备用。所述磁颗粒稀释液为0.05mol/L pH7.4MES缓冲液，内含2％牛血清白蛋白、3％聚乙二醇6000和0.1％蛋白稳定剂。

7.根据权利要求6所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述标记有磷光发光材料的抗原或抗体采用异硫氰基(-NCS)偶联法进行标记。

8.根据权利要求9所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述磷光发光材料为金属卟啉系列荧光染料，所述金属卟啉为铂/钯卟啉，所述金属卟啉的激发光光谱范围为390-420nm，发射光波长范围为600-700nm。

9.根据权利要求6所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述配制洗涤液，配方为0.05mol/L pH7.2Tris-HCl缓冲液，内含0.02％吐温20和0.05％叠氮钠。

10.一种权利要求6所述制备方法制备的时间分辨荧光检测试剂盒在检测生物样品中的应用，其特征在于，检测对象为全血、血浆、血清、脑脊液、尿液、唾液、粪便以及前列腺液标本中抗原、抗体、药物、激素、毒品、抗生素、肿瘤标志物目标待测物，以及蔬菜、水果、食品、水源中农药、抗生素的残留检测。