[发明专利]rbo/Efr3a/Efr3b基因或其蛋白在诊断和治疗阿尔茨海默病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及阿尔茨海默病的诊断和治疗领域。更具体地说，本发明涉及rbo/Efr3a/Efr3b基因或其蛋白在诊断和治疗阿尔茨海默病中的应用、利用rbo/Efr3a/Efr3b基因或其蛋白诊断和治疗阿尔茨海默病的方法以及相关的试剂盒。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是老年人中最常见的神经退行性疾病，以进行性学习记忆能力丧失为特征。突触功能异常和丢失被广泛认为是AD学习记忆障碍的细胞机制[1-4]。Aβ积累在AD多种病理改变中起着重要作用，包括突触功能异常和丢失、线粒体异常、炎症和神经元死亡等[2，5-8]。但是，Aβ积累与这些病理改变之间的细胞分子机制还不清楚。

Aβ在AD病人和动物模型的脑内以散在沉淀和纤维状斑块形式积累。大量研究表明从AD病理改变早期起，神经元内就有Aβ积累，并可能在突触障碍、淀粉样肽斑块形成和神经元死亡中起重要作用[9-13]。此外，被认为对突触和认知功能最具破坏力的寡聚状Aβ[4、14、15]在细胞内形成[16]并在AD病人神经元内积累[17]。另外，与细胞膜偶联的Aβ单体和二聚体能在AD型痴呆病人大脑的颞叶和额叶检测到，而不能在非AD型痴呆病人和对照组的相应脑区检测到[18]。这些结果提示神经元内和神经元细胞膜上的Aβ在AD病理改变中起重要作用。

神经元内Aβ积累可由胞外的Aβ内吞（internalization）或胞内产生的Aβ滞留所致[10]。在培养细胞中，胞外Aβ内吞涉及到几个Aβ结合蛋白[10]，包括α7尼古丁型乙酰胆碱受体(α7nAChR)[19]、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)[20、21]、晚期糖基化终产物受体(RAGE)[22]等。但是，这些蛋白在体内是否直接参与神经元内Aβ积累还不清楚。

果蝇是生物科学领域重要的模式生物之一，被用于研究多种人类疾病的机理，如癌症、心血管疾病以及多种神经系统疾病。在以果蝇为模型的生命科学研究中，果蝇的行为，尤其是运动能力是重要的检测指标之一。这一检测数据可被广泛用于评估基因型及环境对果蝇的影响。

果蝇作为具有自由运动能力的生物具有趋性，即对外部刺激的反应而引起运动。在单向的重力刺激下，果蝇会有逆向的行动反应，即负趋地性。利用果蝇这一特性，生物科学工作者找到了检测果蝇的爬管能力的方法，以比较不同基因型或者环境因子对果蝇运动能力的作用：轻敲果蝇，将其震落至管底部，随后果蝇由于负趋地性会向与重力相反的方向爬行。生物科学工作者通过记录固定时间内果蝇爬行的距离，从而可以比较其运动能力。

但是这种传统的果蝇爬管能力的检测方法具有一定的局限性。以人力震动果蝇所在的管，力度容易有差异，从而影响实验结果。如果需要大批量对果蝇运动能力进行评估，会占用生物科学工作者较长的时间，且实验后的数据分析同样会耗费较大的时间、精力。

因此，本领域还急需操作简便、实验差异性低，再现性高、精确的自动检测果蝇爬管能力的系统。

发明内容

本发明的目的是提供用于筛选诊断和治疗阿尔茨海默病的药物的物质以及筛选方法、诊断和治疗阿尔茨海默病的方法和相关的试剂盒。

本发明的目的还在于提供一种自动检测模型动物运动能力的系统。

在第一方面，本发明提供一种复合物，所述复合物由以下部分组成：

(a)rbo/Efrr3a/Efr3b蛋白；和

(b)Aβ或寡聚体形式的Aβ。

在第二方面，本发明提供本发明第一方面所述的复合物在筛选预防或治疗阿尔茨海默病的药物中的应用。

在第三方面，本发明提供一种筛选预防或治疗阿尔茨海默病的药物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)将待测物质加入包含rbo/Efr3a/Efr3b蛋白和Aβ或寡聚体形式的Aβ的体系中；和

(b)检测本发明第一方面所述复合物的形成；

如果与未加入所述待测物质的包含rbo/Efr3a/Efr3b蛋白和Aβ或寡聚体形式的Aβ的对照体系相比，本发明第一方面所述复合物的形成减少，则所述待测物质为预防或治疗阿尔茨海默病的药物。

在第四方面，本发明提供一种筛选预防或治疗阿尔茨海默病的药物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)构建过表达rbo/Efr3a/Efr3b蛋白的动物模型；

(b)将待测物质给予所述动物模型；和

(c)检测所述动物模型中本发明第一方面所述复合物的形成；