[发明专利]从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法

权利要求书

1.从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，其特征是包括如下步骤：

1）、将新鲜牛乳于3~5℃经离心和脱脂纱布过滤处理，从而除去乳脂肪，得首次滤液；

2）、首次滤液调节pH至4.5~4.7，室温下静置20~40min；得处理后首次滤液；

3）、将处理后首次滤液于3~5℃经离心和脱脂纱布过滤处理，所得的滤液重复上述3~5℃下的离心和脱脂纱布过滤处理，得二次滤液；

4）、二次滤液调节pH至1.9~2.1，得处理后二次滤液；

5）、先按照每1L处理后二次滤液添加65~75g氯化钠的用量比在二次滤液中加入氯化钠；然后再调节pH至1.9~2.1，接着室温下静置15~25min；

6）、将步骤5）所得物于3~5℃下经离心和脱脂纱布过滤处理，收集滤液； 

7）、先按照每1L滤液添加220~240g氯化钠的用量比在滤液中加入氯化钠；然后再调节pH至1.9~2.1，接着室温下静置15~25min；

8）、将步骤7）的所得物于室温下离心，将所得的沉淀溶解于PBS缓冲液或蒸馏水中；

9）、室温下，将步骤8）所得的溶液用截留分子量10000的滤膜进行超滤2~8小时；所得的截留液经冻干，得冻干β-乳球蛋白粉末。

2.根据权利要求1所述的从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，其特征是：

将冻干β-乳球蛋白粉末进行提纯：用C8反相键合硅胶色谱柱、以乙睛-水为流动相进行梯度洗脱；分别得A型β-乳球蛋白和B型β-乳球蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步骤1）为：将新鲜牛乳以3500~4500g，3~5℃，离心25~35min，4层脱脂纱布过滤；

所述步骤3）为：将处理后首次滤液于3~5℃，4500~5500g下离心15~25 min，4层脱脂纱布过滤；

所述步骤6）为：将步骤5）所得物于3~5℃，8000~12000g下离心15~25min，4层脱脂纱布过滤；

所述步骤8）为：将步骤7）的所得物于室温下9000~11000g 离心15~25min。

4.根据权利要求3所述的从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步骤2）、步骤4）中均用0.8~1.2 M 的盐酸调节pH值；

步骤5）和步骤7）均用1.8~2.2M的 盐酸调节pH值。

5.根据权利要求4所述的从原料乳中分离β-乳球蛋白的方法，其特征是：

所述步骤9）中的冻干为：于-40℃~-50℃下将截留液冻干至恒重。