[发明专利]禽传染性支气管炎病毒H120毒株的PCR检测引物及检测方法

权利要求书

1.禽传染性支气管炎病毒H120毒株的RT-PCR检测引物，其特征在于两对引物核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1~2和SEQ ID NO:3~4。

2.一种禽传染性支气管炎病毒H120毒株的RT-PCR检测方法，其特征在于以待检样品RNA为模板，用权利要求1所述的两对引物进行RT-PCR扩增，如果同时扩增出653bp和230bp两个长度的目的片段，则说明待检样品中有禽传染性支气管炎病毒H120毒株。

3.根据权利要求2所述禽传染性支气管炎病毒H120毒株的RT-PCR检测方法，其特征在于PCR反应体系含有一步法PCR混合酶、缓冲液、SEQ ID NO:1~4所示引物、样品RNA和无RNA酶的水。

4.根据权利要求2所述禽传染性支气管炎病毒H120毒株的RT-PCR检测方法，其特征在于RT-PCR的反应程序为：

（1）逆转录：50℃ 30min；

（2）预变性：92℃ 4min；

（3）变性：94℃ 30sec；退火：55℃ 30sec；延伸：72℃ 45sec；共进行30个循环；

（4）延伸：72℃10min。

5.根据权利要求2所述禽传染性支气管炎病毒H120毒株的RT-PCR检测方法，其特征在于扩增的653bp目的片段为S1基因，核苷酸序列为SEQ ID NO:5；230bp的目的片段为3’UTR基因，核苷酸序列为SEQ ID NO:6。