[发明专利]抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体、其制备方法及应用

权利要求书

1.抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体，其特征在于，其由保藏号为CGMCC No.6180的抗派琴虫膜蛋白的杂交瘤细胞株IAQ1101分泌产生。

2.制备权利要求1所述抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体的方法，其特征在于，将从感染派琴虫的贝类组织中提取的总DNA作为模板，以5’-GGCTGATATCGGATCCTCCTCTTGTCCCACAGGGGATGC-3’和5’-CCGCAAGCTTGTCGACTTATGACGTAGGACATGTCGG-3’为引物进行PCR扩增，将扩增产物插入到表达载体中，并转化宿主细胞，随宿主细胞的复制进行蛋白表达，然后用纯化后的目的蛋白免疫Balb/c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，筛选得到杂交瘤细胞株IAQ1101，由其分泌产生抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，PCR扩增体系以25μL计为：

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，PCR扩增条件为：95℃5min；95℃1min，55℃1min，72℃1min，共40个循环；72℃10min。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述表达载体为pET32a，所述宿主细胞为大肠杆菌BL21。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述小鼠骨髓瘤细胞为NS1、SP2/0或X63Ag8.653。

7.含有权利要求1所述抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体的检测试剂盒。

8.权利要求1所述抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体或权利要求7所述检测试剂盒在贝类派琴虫检测中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其采用免疫荧光标记的方法，先对抗派琴虫膜蛋白的单克隆抗体进行荧光标记，然后利用该荧光标记的抗体检测贝类组织切片或贝类组织匀浆物中感染的派琴虫。

10.抗派琴虫膜蛋白的杂交瘤细胞株IAQ1101，其保藏号为CGMCC No.6180。