[发明专利]一种固定化磷脂酶 A1催化合成果糖月桂酸单酯的方法

权利要求书

1.一种利用固定化磷脂酶A1催化制备果糖月桂酸单酯的方法，其特征在于将月桂酸与果糖经酶促催化反应合成果糖月桂酸单酯，包括以下步骤：

（1）磷脂酶A1的固定化：取5~10份质量经活化处理的DA-201大孔吸附树脂，10~25份质量的磷酸盐缓冲液，0.5~2份质量游离磷脂酶A1混合，在25~35℃下搅拌吸附2~6h，然后过滤，得大孔吸附树脂固定化磷脂酶，将制好的固定化酶真空干燥，备用；

（2）制备脱水有机溶剂：将3?或4?分子筛置于95～105℃烘箱内活化5～10h，再置于干燥器内冷却至室温，备用；之后，再将活化后的3?或4?分子筛按照每升溶剂添加50～80份质量的量加入到待用的作为反应介质的有机溶剂中，密封放置24～72h，过滤除去分子筛，得脱水有机溶剂；

（3）固定化磷脂酶A1催化合成果糖月桂酸单酯：取10～40.6份质量月桂酸和1.8～36.5份质量果糖置于上述脱水有机溶剂中混合，其中月桂酸浓度为5～24wt%，再加入相对于月桂酸质量8～25wt%的固定化磷脂酶A1开始反应；反应0～2h后按照相对于月桂酸质量0.5-2倍的量加入活化后的3?或4?分子筛以除去反应中生成的水；在35℃～45℃下振荡或搅拌反应8～96h，振荡速度150~185r/min；反应结束后，采用过滤方法将固定化磷脂酶A1、分子筛及未反应的糖除去；所得滤液通过旋转蒸发除去有机溶剂，提纯后得到产物果糖月桂酸单酯。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中磷脂酶A1是诺维信公司的一种微生物来源的磷脂酶，商品名为Lecitase Ultra；其用量为大孔吸附树脂质量的5~20wt%。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤（2）中反应介质有机溶剂种类为正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、氯仿、丁酮、丙酮或甲乙酮中的任意一种，或两种以上的混合物；且所述的反应介质有机溶剂极性范围即Log P=3.0～7.0。