[发明专利]一种抑制原发性肝癌生长和转移的新方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肝癌治疗方法，该方法以可以抑制肝癌生长和转移的miRNA-885-5p作为靶点来治疗肝癌，通过瘤内注射合成的miRNA-885-5p模拟物（miRNA-885-5p Agomir）来实现治疗作用。 

背景技术

原发性肝细胞癌是常见的消化道恶性肿瘤，在世界范围内是排名第五的恶性肿瘤，世界每年新发现恶性肿瘤病人约635万例，其中肝癌大约占26万例，26万例中42.5%发生在我国且其发病率仍然呈逐年递增的趋势。肝癌发现一般为晚期，有效的治疗方法为肝切除和肝移植，常规化疗对肝癌治疗效果并不明显，所以肝癌的早期诊断尤为重要，探索有效的肝癌临床诊断标记物和治疗策略具有重要意义。 

随着分子生物学技术的不断发展，人们对肿瘤发生发展机制的了解越来越深入。依据肿瘤发生中涉及的异常分子和基因，设计和研制针对特定分子和基因靶点的药物，选择性杀伤肿瘤细胞，这种方法称为肿瘤分子靶向治疗。近年来，肿瘤分子靶向治疗已经成为肿瘤治疗新的发展方向，肿瘤分子靶向药物的研究和临床应用使肿瘤治疗水平提升到一个新的高度。 

miRNA在细胞生长、发育、分化、死亡等生物过程中起着重要的作用，同时，miRNA几乎参与了血细胞生成、胰岛素分泌、神经系统构成和人类癌细胞生长等每一个生命活动的过程。序列分析表明，有1/3以上的人类基因直接受到miRNA的调控，而且越来越多的试验证据表明miRNA还有很多功能未被发现。miRNA具有肿瘤抑制因子及癌基因的作用，被称作oncogenic miRNA，即oncomiR。oncomiR的失调与基因突变或表观遗传变异（包括缺失突变、扩增突变、点突变及DNA异常甲基化 等）有关。其表达情况与人类多种恶性肿瘤的发生、发展、诊断、预后相关。 

miR-885-5p是一种已知的小分子RNA，NCBI基因库查询显示该基因定位于3号染色体的p25.3的10411173-10411246区间（负链），由Berezikov E等克隆测序发现。miR-885-5p的相关基本信息为：Accession No：MIMAT0004947，基本序列为5’UCCAUUACACUACCUGCCUCU3’。miR-885-5p在肿瘤中的研究还处于刚刚起步阶段，现有的研究表明其在神经母细胞瘤起到抑制肿瘤生长的作用。另外，新近的研究发现miR-885-5p可以抑制胶质瘤的转移。我们的前期研究发现，miR-885-5p和肝脏病的发病过程相关。然而，其对原发性肝癌发生发展的影响还未见报道。 

本发明首次发现miRNA-885-5p可以作为抑制肝癌生长和转移的靶点，激活miRNA-885-5p活性的miRNA-885-5p模拟物可用于治疗肝癌。 

发明内容

本发明的目的在于解决目前原发性肝癌治疗困难，化疗耐药性较高的问题，提供了一种靶向治疗肝癌的新方法，所述方法以可以抑制肝癌生长和转移的miRNA-885-5p作为靶点，利用miRNA激动剂来治疗肿瘤，其中miRNA激动剂包括miRNA-885-5p模拟物。通过瘤内注射合成的miRNA-885-5p模拟物,例如由广州锐博生物科技有限公司合成的miRNA-885-5p模拟物（miRNA-885-5p agomir）来实现肝癌的治疗。miRNA agomir是经过特殊化学修饰的miRNA激动剂，其通过模拟内源性miRNA进入miRISC复合物来调节靶mRNA的表达而发挥作用。与普通的miRNA mimics相比，agomir在动物体内具有更高的稳定性和miRNA促进效果。miRNA agomir在体内具有浓度梯度相关性，稳定性高，其作用时间可长达数周。 

本发明建立了NOD/SCID小鼠皮下异种成瘤模型，通过瘤内注射PBS、对照agomir或miRNA-885-5p agomir设置对照组和试验组，跟踪测量试验组和对照组的瘤体体积，并用H&E染色的方法对对照组和试验组 中的肿瘤坏死细胞的情况进行评判。实验结果表明miRNA-885-5p agomir能够抑制肝癌细胞的生长。