[发明专利]人白介素22在制备肝移植排斥反应的标志物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医学领域，特别涉及肝移植排斥反应的标志物。

背景技术

肝移植手术，是指通过手术植入一个健康的肝脏到患者体内，使终末期肝病患者肝功能得到良好恢复的一种外科治疗手段。按照供肝种植部位不同，可分为原位肝移植术和异位肝移植术。原位肝移植(OLT)已成为肝脏外科手术的成熟技术，并且对许多终末期肝病患者而言，它是唯一有效的治疗手段。尽管有免疫抑制剂的成功应用，而由浸润的淋巴细胞、单核细胞和其他炎症细胞引起的急性移植物排斥反应，依旧是早期供体损伤及移植后生存率的主要危险因素之一。有研究表明，排斥反应中起支配作用的IFNγ对移植物损伤并非是不可或缺的，暗示还有其他因子参与引起排斥反应的炎症反应。最新研究表明，TH17细胞参与移植排斥反应的免疫应答。IL-22是IL-10家族的成员之一，主要由TH17细胞、TH22细胞、NK细胞及淋巴组织诱导细胞(LTi)等产生，IL-22主要作用于皮肤、肝脏及肾脏，发挥固有免疫、损伤保护及促进再生的作用。IL-22对肝脏有着保护及促炎的双重作用，研究证明IL-22对肝部分切除后的肝细胞再生起重要的促进作用，最新的数据证明IL-22参与肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。推测IL-22参与肝移植术后的肝细胞再生及缺血再灌注等作用。但是，至今还没有IL-22(人白介素22)参与移植排斥反应的免疫应答的报道。

发明内容

本发明的目的之一在于提供人白介素22的新应用，该应用为判断肝移植排斥反应提供了新的思路。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

人白介素22在制备肝移植排斥反应的标志物中的应用。

进一步，所述肝移植排斥反应为原位性肝移植排斥。

进一步，人白介素22的蛋白在制备肝移植的第1-3天肝移植排斥反应的标志物中的应用。

进一步，人白介素22的mRNA在制备肝移植排斥反应的标志物中的应用。

上述技术方案是通过如下实验来证实其功能的：成功建立大鼠原位肝移植动物模型，分为排斥组和耐受组(各15只)，取术后1，3，5，7天大鼠血浆及肝组织标本，应用免疫组化染色、Western blot及荧光定量PCR检测其肝组织内IL-17(白介素-17)及IL-22(白介素-22)的细胞、蛋白及mRNA的表达情况。结果显示排斥组IL-17血浆浓度显著高于耐受组；在肝组织中，IL-17及IL-22的淋巴细胞阳性率、蛋白表达水平及mRNA表达水平排斥组显著高于耐受组。由此可以证实人白介素22在制备肝移植排斥反应的标志物中的应用。现有技术中：IL-17可作用于自身免疫疾病和病原体的防御还参与移植物排斥反应，在人及动物的肾脏、心脏及肺移植中发现IL-17水平的升高。在肝移植中，有临床研究表明TH17相关因子IL-17及IL-23在肝移植术后的患者血清中显著增高。同IL-17相比，IL-17在排斥组肝组织内术后第1天及第3天升高明显，并在随后的5、7天内逐渐降低，IL-22在排斥组术后第1天升高明显并从第3天起逐渐下降。排斥组的IL-17和IL-22表达相比于耐受组在术后均有统计学意义。

附图说明

图1为HE组织切片，其中，TOL是指耐受组，REJ是指排斥组。

图2为HE组织切片Banff的RAI评分分析图。

图3为大鼠肝移植模型建立后的肝功能指标变化情况分析图，其中，A为以ALT为指标，B为以AST为指标。

图4为免疫组化显示移植后1，3，5，7天大鼠肝组织中IL-17及IL-22的变化情况。

图5为Western blotting检测移植后1，3，5，7，天大鼠肝组织内的IL-17、IL-22。

图6为Western blotting检测移植后1，3，5，7，天大鼠肝组织内的IL-17、IL-22变化分析图，其中A为IL-17的变化分析图，B为IL-22的变化分析图，分析图中，横坐标为时间，纵坐标为用紫外分光光度计测定的相对浓度(与内参GAPDH比值)。

图7为移植后1，3，5，7天大鼠肝组织中IL-17、IL-22的mRNA的变化分析图，其中，a为IL-17的变化分析图，b为IL-22的变化分析图，横坐标为时间，纵坐标为mRNA的表达水平(与内参β-Actin比值)。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和有点更加清楚，下面将结合附图对本发明的优选实施例进行详细的描述。