[发明专利]一种快速测定乳酸菌发酵产物有机酸种类和产量的方法有效
| 申请号： | 201210216725.5 | 申请日： | 2012-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN102721781A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 刘媛媛;汪攀;张军;王安如 | 申请（专利权）人： | 北京大北农科技集团股份有限公司;吉林大北农农牧科技有限责任公司;漳州大北农农牧科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/89 | 分类号： | G01N30/89 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100080 北京市海淀区中*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 测定 乳酸菌 发酵 产物 有机酸 种类 产量 方法 | ||
1.一种快速测定乳酸菌发酵产有机酸种类和产量的方法，包括分别制备样品溶液和标准品溶液，用反相HPLC梯度洗脱法测定乳酸菌发酵产物中有机酸的种类和含量，其特征在于，流动相A液为甲醇，流动相B液为0.01M的磷酸二氢钠水溶液，0~9.5min为100%B液，9.5~10min A液升至55%，B液降至45%，10~13min保持55%A液，45%B液，13~15min A液降至45%，B液升至55%，15~25min保持55%A液，45%B液，25~28min B液升至100%，28~30min保持100%B液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的反相HPLC的色谱条件为：色谱柱为C18柱，250mm×4.6mm，5μm，采用低压梯度洗脱，检测波长为215nm，柱温30~40℃，采样时间为30min。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的柱温为35℃。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的样品溶液制备方法为：取乳酸菌发酵液1mL，加入体积分数50%的硫酸200μL，10000r/min离心5min，取上清液100μL稀释至500μL，经0.45μm滤膜过滤。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的标准品溶液制备方法为：分别取有机酸标准品，加入水配成50mg/mL、100mg/mL或150mg/mL母液备用，使用时混合并稀释至所需浓度，经0.45μm滤膜过滤。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脱流速0~10min为0.7mL/min，10~30min为1mL/min。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的0.01M磷酸二氢钠水溶液pH值为2.8~3.0。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，进样量为10μL。
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