[发明专利]一种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法

说明书

技术领域：

本发明属于植物学领域，尤其涉及一种杜鹃花的栽培技术，具体来说是一种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法。

背景技术：

杜鹃花是世界著名的盆栽花卉和园林绿化植物，在我国是具有“花中西施”美誉的传统名花，深受人们的喜爱，种苗需求量大。播种繁殖及组织培养技术的突破是杜鹃花品种选育、种苗生产的关键环节。目前，很多杜鹃花种类能够播种繁殖和组织培养扩繁，但是幼苗生长缓慢、移栽成活率低、叶片发黄等问题是限制品种选育和种苗生产效率的关键因素。

杜鹃花是典型的菌根植物，菌根的形成可以增强寄主植物分解有机质和捕获氮的能力，促进植物的营养吸收，提高寄主抵抗逆境胁迫（如干旱、盐碱、重金属等）的能力，增加寄主的生长量等。许多研究表明菌根真菌在多种农作物、园艺作物上具有很高的应用价值，尤其是对植物苗期生长促进作用非常突出。如利用菌根菌剂开展湿地松育苗，得到的菌根化苗整齐粗壮，幼苗菌根化率达80%以上（戴玉明，“湿地松菌根化育苗试验”，《安徽农业科学》,2000,28(2):236）。组织培养技术是苗木生产的重要技术，但很多植物组培苗在练苗或移栽阶段常成活率低、生长缓慢的问题。研究表明：AM真菌能促进苹果、葡萄、柑桔等组培苗的生长，提高其移栽成活率（李瑞卿、刘润进、李敏，“园艺作物菌根及其在生态农业的应用”，《中国生态农业学报》，2002，20（1）：24~27）。墨兰组培苗在移栽阶段接入菌根真菌，8个月的生长后，幼苗干重比对照增加13.63%～16.95%，显著地促进了兰苗的生长（黄磊，贺筱蓉，郑立明等，“促进兰花组培苗生长的墨兰菌根真菌研究初报”，《热带作物学报》，2004，25（1）：36~39）。可见，实现种苗菌根化是克服组培苗生长缓慢，提高成活率的一个有效措施。我们曾对云锦杜鹃播种幼苗接种技术进行了初步探索，结果表明采用栽培基质单层接种法有利于菌根的形成及幼苗的生长（于芳、张春英、尹丽娟等，“云锦杜鹃菌根真菌接种技术及其效应”，《福建农林大学学报（自然科学版）》，2008，37（4）：360~364）。但在后来的试验中发现使用云锦杜鹃单层接种法常出现菌株生长过快，影响幼苗菌根化进程及后期生长。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是提供一种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法，所述的这种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法要解决现有技术中使用云锦杜鹃单层接种法常出现菌株生长过快、影响幼苗菌根化进程及后期生长的技术问题。

本发明提供了一种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法，包括以下步骤：

1)一个准备栽培基质及营养液的步骤，所述的栽培基质由草炭和黄沙组成，所述的草炭和黄沙的重量比为2~3：1，所述的营养液是液体培养基，在所述的液体培养基中，葡萄糖的质量百分比浓度在0.1~0.3%之间；

2)一个对无菌苗进行接种的步骤，将播种或组织培养生根幼苗移栽入无菌处理的栽培基质中，接种至少1个菌块，所述的菌块选自保藏号为CGMCC No：6010的真菌菌株或者保藏号为CGMCC No：6031的真菌菌株的真菌菌株中的任意一种或者两种的混合，所述的菌块的直径在2~4mm之间，所述的菌块接种处距离根系0.5~1.0cm，接种后幼苗放置在培养室培养，培养室条件为温度22~25℃，光照周期16~10h/8~14h，光强度为2000~4000lux，培养的时间为10~12周。

进一步的，所述的液体培养基为MMN液体培养基。

进一步的，所述的栽培基质中，所述的草炭和黄沙的重量比为3：1。

本发明还提供了一种真菌菌株，保藏号为CGMCC NO:6031，所述的菌株属于子囊菌纲、壳霉目、杯霉科、树粉孢属。

进一步的，本发明还提供了上述的一种真菌菌株在促进杜鹃花幼苗生长中的用途。

本发明的液体培养基中，葡萄糖的质量百分比浓度控制在0.1~0.3%。葡萄糖浓度高，菌株生长太快而不利于植物的生长。

本发明中的一种菌根真菌菌株（OBJF31菌株），其分类命名为Oidiodendron sp.，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）中，中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号（中科院微生物研究所），保藏日期为2012年4月20号，保藏号为CGMCCNo：6010。