[发明专利]菊糖芽孢乳杆菌的D-乳酸脱氢酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.蛋白质，是如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有D-乳酸脱氢酶活性的由序列1衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子是编码权利要求1所述蛋白质的基因；所述基因是如下1）至4）中任一所述的DNA分子：

1）编码序列为序列表中序列2的DNA分子；

2）序列表中序列2所示的DNA分子；

3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；

4）与1）或2）或3）限定的DNA分子具有80%以上同源性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；所述重组载体为重组克隆载体或重组表达载体。

5.权利要求1所述的蛋白在作为D-乳酸脱氢酶中的应用。

6.权利要求1所述的蛋白、或权利要求2或3所述的基因在如下（a）或（b）中的应用：

（a）催化丙酮酸生成D-乳酸；

（b）催化苯基丙酮酸生成D-苯基乳酸。

7.一种制备D-乳酸脱氢酶的方法，包括如下步骤：将权利要求4所述的重组表达载体导入宿主细胞，表达得到权利要求1所述的蛋白质，即为D-乳酸脱氢酶。

8.利用权利要求1所述蛋白质生产D-苯基乳酸的方法，包括如下步骤：将权利要求1所述蛋白质、苯基丙酮酸、和NADH或NADPH，在27-35℃，pH5.0-6.0的条件下反应，得到D-苯基乳酸。

9.利用权利要求1所述蛋白质生产D-乳酸的方法，包括如下步骤：将权利要求1所述蛋白质、丙酮酸、和NADH或NADPH，在27-35℃，pH5.0-6.0的条件下反应，得到D-乳酸。