[发明专利]一种快速高效测定葡萄酒中酚酸的方法

权利要求书

1.一种快速高效测定葡萄酒中酚酸的方法，其特征在于利用超高效液相色谱UPLC和二极管阵列检测器同时对葡萄酒中13种酚酸进行定性和定量分析：

所述检测13种酚酸，分别为：没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、香草酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、芥子酸、鞣花酸、水杨酸；

（1）标准溶液配置：

分别精确称取所述13种酚酸各10.0-15.0mg，用甲醇溶解并转移至10 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，封口，作为标准贮备液，在-20℃保存备用；使用前，根据实验需要将此标准贮备液用甲醇稀释至适宜含量，以配制标准工作液和混合标准工作液；

（2）葡萄酒样品经过0.45μm滤膜过滤，用于进行检测分析；

（3）超高效液相色谱分离检测条件：

色谱柱：美国Bridge Ethylene Hybrid (BEH) C18色谱柱或同类UPLC C18色谱柱

流动相A：乙酸:水为2:98，v/v，即2%乙酸水；

流动相B：甲醇；

流速：0.3 mL/min；

洗脱程序：0-3.2 min，A为92％-80％，B为8％-20％；3.2-8 min，A为80％-56％，B为20％-44％；8-8.2 min，A为56％-92％，B为44％-8％；8.2-10 min，A为92％，B为8％；

检测波长：龙胆酸为320 nm，其余均为280 nm；

柱温50℃，进样量为1 μL，以峰面积外标法定量；

紫外检测器的选择：选用二极管阵列检测器；

（4）定性：

对13种酚酸混合标准品进行色谱检测，得到13种酚酸标准品色谱图；对葡萄酒样品进行色谱检测，得到葡萄酒样品中13种酚酸的UPLC色谱图；通过增高法进行定性分折；

（5）定量

制作标准曲线：准确配制0.2-211.2 mg/L的五个不同浓度的13种酚酸的混合标样，按照上述液谱条件进样，进样量为1μL；以峰面积Y为纵坐标，质量浓度X为横坐标，计算得到13条标准曲线；

定量：每种待测物质分别对应于外标做标准曲线，经过UPLC检测后将峰面积代入相对应的标准曲线方程计算出待测物质的含量。