[发明专利]辅助鉴定马铃薯病毒的特异引物对及其应用有效
申请号: | 201210208281.0 | 申请日: | 2012-06-21 |
公开(公告)号: | CN103509878A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 仲乃琴;武晓敏;马银平;董彦旭;马琼;蒙静;沈振荣 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 辅助 鉴定 马铃薯 病毒 特异 引物 及其 应用 | ||
1.引物对组合物,由特异引物对甲、特异引物对乙和特异引物对丙组成;所述特异引物对甲由序列表的序列1所示DNA分子和序列表的序列2所示DNA分子组成;所述特异引物对乙由序列表的序列3所示DNA分子和序列表的序列4所示DNA分子组成;所述特异引物对丙由序列表的序列5所示DNA分子和序列表的序列6所示DNA分子组成。
2.权利要求1所述引物对组合物在辅助鉴定马铃薯病毒中的应用。
3.权利要求1所述引物对组合物在辅助检测待测植物样本是否感染马铃薯病毒中的应用。
4.权利要求1所述引物组合物在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b):
(a)辅助鉴定马铃薯病毒;
(b)辅助检测待测植物样本是否感染马铃薯病毒。
5.应用权利要求1所述引物对组合物辅助鉴定马铃薯病毒的方法,包括如下步骤:
以待测病毒的cDNA为模板,同时采用所述特异引物对甲、所述特异引物对乙和所述特异引物对丙进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;如果所述PCR扩增产物为一种且大小为250-500bp,所述待测病毒为候选的马铃薯X病毒;如果所述PCR扩增产物为一种且大小为100-250bp,所述待测病毒为候选的马铃薯S病毒;如果所述PCR扩增产物为一种且大小为500-750bp,所述待测病毒为候选的马铃薯卷叶病毒。
6.应用权利要求1所述引物对组合物辅助检测待测植物样本是否感染马铃薯病毒的方法,包括如下步骤:
以待测植物样本的cDNA为模板,同时采用所述特异引物对甲、所述特异引物对乙和所述特异引物对丙进行PCR扩增,得到PCR扩增产物;
如果PCR扩增产物只有一种且大小为250-500bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯X病毒;如果PCR扩增产物只有一种且大小为100-250bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯S病毒;如果PCR扩增产物只有一种且大小为500-750bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯卷叶病毒;
如果PCR扩增产物有两种,且大小分别为250-500bp和100-250bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯X病毒和马铃薯S病毒;如果PCR扩增产物有两种,且大小分别为250-500bp和500-750bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯X病毒和马铃薯卷叶病毒;如果PCR扩增产物有两种,且大小分别为100-250bp和500-750bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯S病毒和马铃薯卷叶病毒;
如果PCR扩增产物有三种,且大小分别为250-500bp、100-250bp和500-750bp,所述待测植物样本疑似感染马铃薯X病毒、马铃薯S病毒和马铃薯卷叶病毒;
如果PCR扩增产物不为以上所述任何一种,所述待测植物样本疑似未感染马铃薯X病毒、马铃薯S病毒和马铃薯卷叶病毒。
7.序列表的序列1所示DNA分子和序列表的序列2所示DNA分子组成的特异引物对。
8.权利要求7所述特异引物对在辅助鉴定马铃薯X病毒中的应用。
9.权利要求7所述特异引物对在辅助检测待测植物样本是否感染马铃薯X病毒中的应用。
10.权利要求7所述特异引物对在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的功能为如下(c)或(d):
(c)辅助鉴定马铃薯X病毒;
(d)辅助检测待测植物样本是否感染马铃薯X病毒。
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