[发明专利]目标诱导链释放和限制性内切酶酶切循环的信号放大技术建立及赭曲霉素A的检测有效
| 申请号： | 201210208159.3 | 申请日： | 2012-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN102830113A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 混旭;刘芳 | 申请（专利权）人： | 青岛科技大学 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266061 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 目标 诱导 释放 限制性 内切酶酶切 循环 信号 放大 技术 建立 曲霉 检测 | ||
1.基于目标诱导链释放和限制性内切酶酶切循环的信号放大技术建立及其在赭曲霉素A超灵敏度检测中的应用，其特征包括以下步骤：
(a)首先，将适体和适体互补序列固定在磁珠表面，在有目标物存在时，适体互补序列从磁珠表面脱落。经磁性分离后，将适体互补序列与模版DNA杂交，在DNA聚合酶的作用下，适体互补序列会沿着模版生长，形成完全互补双链DNA。
(b)将步骤(a)的生成的双链DNA用切割酶切割，得到一条短链DNA，同时得到新的生长位点，在聚合酶酶和切割酶的作用下，生长和切割会不断进行产生大量短链DNA。
(c)将(b)所得短链DNA用化学发光探针进行测定，从而实现对目标物的检测。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中的适体为赭曲霉素A适体(DNA1)。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中适体互补序列为赭曲霉素A适体互补序列(DNA2)，其与赭曲霉素A适体(DNA1)部分互补。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中的模版DNA为聚合模版DNA3，其与赭曲霉素A适体互补序列部分互补。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中的酶为DNA聚合酶Phi29。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(b)中的酶为限制性内切酶Nb.BbvCI。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(c)中探针为DNA和ABEI标记的羧基化的二氧化硅化学发光纳米粒子。
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