[发明专利]钾离子浓度检测方法有效
| 申请号: | 201210205843.6 | 申请日: | 2012-06-18 |
| 公开(公告)号: | CN102866148A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
| 发明(设计)人: | 唐亚林;孙红霞;杨千帆;尚倩;姜薇;盖伟;向俊锋 | 申请(专利权)人: | 中国科学院化学研究所 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N33/52 |
| 代理公司: | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人: | 王磊;许伟群 |
| 地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 离子 浓度 检测 方法 | ||
1.一种检测液体样品中钾离子浓度的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)用pH6.2~8.2的缓冲溶液以一定的钾离子浓度梯度配制多个溶液样本,其中每个所述溶液样本中含有相同浓度的能够形成G-四链体的DNA分子、相同浓度的钠离子以及相同浓度的菁染料;
(2)在待测液体样品中加入能够形成G-四链体的DNA分子、菁染料以及缓冲液,以使待测液体样品中的能够形成G-四链体的DNA分子的浓度、菁染料的浓度以及pH值与步骤(1)中的溶液样本一致,从而得到测试溶液,并记录待测液体样品被稀释的比例;
(3)将测试溶液与步骤(1)中获得的标准比色样品的颜色进行对比,颜色与测试溶液相同的标准比色样品的钾离子浓度与测试溶液的钾离子浓度一致,并通过待测样品的稀释比例计算待测样品的钾离子浓度。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述菁染料为式I的化合物,
式I
其中:R1为C1-C6的烷基、苯基、烷基取代的苯基;R2、R3、R4和R5独立地选自H或C1-C6的烷基,或者R2和R3与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构,或者R4和R5与它们所连接的碳原子一起形成5元至7元的环结构;R6和R7为C1-C6烷基或者磺酸基取代的C1-C6烷基;Y为反离子,根据R6和R7所带电荷的不同而不同,若R6和R7为烷基,则Y为卤素阴离子;若R6和R7只有一个带有磺酸根,则无需Y作为反离子;若R6和R7均带有磺酸根,则Y为三乙胺阳离子;X1,X2独立地选自C、O、S、Se或Te。
3.如权利要求2所述的方法,其中所述C1-C6的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。
4.如权利要求2所述的方法,其中R1选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基、异己基、苯基、甲基苯基或二甲基苯基;R2、R3、R4和R5独立地选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、正己基或异己基。
5.如权利要求2所述的方法,其中所述5元至7元环结构为含有或不含有N或S原子的饱和或不饱和环结构。
6.如权利要求2所述的方法,其中Y选自氟、氯、溴、碘阴离子或三乙胺阳离子。
7.如权利要求2所述的方法,其中所述缓冲液选自三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、三乙醇胺缓冲液、咪唑-盐酸缓冲液、双甘氨肽缓冲液、2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲液、磷酸钠-磷酸氢钠缓冲液、巴比妥钠-盐酸缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液、硼砂-氢氧化钠缓冲液或磷酸钠缓冲液。
8.如权利要求1所述的方法,其中所述溶液样本中钾离子浓度在0至300mmol/L的范围,优选在0~100mmol/L的范围,进一步优选在0~10mmol/L的范围,最优选在0~2mmol/L的范围;钠离子浓度在0至200mmol/L的范围,优选在40~160mmol/L的范围;所述菁染料在所述溶液样本中的浓度在5至30μmol/L的范围,优选在5~20μmol/L的范围,所述能够形成G-四链体的DNA分子在溶液样本中的浓度在5~50μmol/L的范围,优选在5至30μmol/L。
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