[发明专利]从链霉菌ATCC15944发酵液中分离抗肿瘤活性成分的方法无效
申请号: | 201210205729.3 | 申请日: | 2012-06-20 |
公开(公告)号: | CN103509089A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 邵雷;郭兆霞;李继安;陈秀华;王娟;陈代杰 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C07K14/36 | 分类号: | C07K14/36;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈长会;谢燕军 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉菌 atcc15944 发酵 分离 肿瘤 活性 成分 方法 | ||
1.从链霉菌ATCC15944发酵液中分离抗肿瘤活性成分的方法,所述方法包括通过发酵液预处理、硫酸铵盐析和膜透析的步骤。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于包括如下步骤:
a)链霉菌ATCC15944发酵液离心取上清,用酸将pH值调为2.0-6.0,离心取上清,即得预处理后的发酵液;
b)将预处理后的发酵液用(NH4)2SO4盐析;
c)将b)中所得沉淀溶于醋酸钠-醋酸缓冲液中,透析脱盐并用透析袋浓缩;
d)将透析液冷冻干燥,得电泳条带单一的抗肿瘤活性成分。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于a)步骤中所述酸为盐酸或者硫酸,优选为盐酸。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于a)步骤中所述酸的浓度为0.1N-5N,优选为0.5N-2N。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于a)步骤中用酸将pH调节为2.5-4.5。
6.如权利要求2所述的方法,其特征在于b)步骤中(NH4)2SO4盐析浓度为10%-100%,优选为50%-70%。
7.如权利要求2所述的方法,其特征在于c)步骤中醋酸钠-醋酸缓冲液的浓度为1-100m mol/L,优选为10-30m mol/L。
8.如权利要求2所述的方法,其特征在于c)步骤中醋酸钠-醋酸缓冲液的pH为3.0-6.0,优选为4.5。
9.如权利要求2所述的方法,其特征在于d)步骤中所得抗肿瘤活性成分由分子量为11000道尔顿的蛋白组成。
10.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述抗肿瘤活性成分的分子式为C476H740N132O166。
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