[发明专利]一种预防龋齿的疫苗及其制备方法有效
| 申请号： | 201210202897.7 | 申请日： | 2012-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN102772792A | 公开（公告）日： | 2012-11-14 |
| 发明（设计）人： | 邹全明;刘开云;张卫军;郭刚;张怡;孙红武;解庆华;樊绍文;卢陆 | 申请（专利权）人： | 重庆原伦生物科技有限公司;中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | A61K39/09 | 分类号： | A61K39/09;A61K39/39;A61P1/02;A61P31/04;C12N15/31;C12N15/70;C07K14/315 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 谢殿武 |
| 地址： | 401121 重庆市北部*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 预防 龋齿 疫苗 及其 制备 方法 | ||
1.一种预防龋齿的疫苗，其活性成分为如下1）或2）或3）所示的蛋白质：
1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
2)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且与预防龋齿相关的由1）衍生的蛋白质；
3）序列表中序列2中第9位至第419位所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的疫苗，其特征在于：
所述疫苗还包括佐剂；所述佐剂为粘膜佐剂。
3.根据权利要求2所述的疫苗，其特征在于：
所述粘膜佐剂为LTS63K。
4.根据权利要求3所述的疫苗，其特征在于：
所述疫苗由序列表中序列2所示的蛋白与LTS63K佐剂组成，所述蛋白与所述LTS63K佐剂的质量比为1:1~25:1。
5.根据权利要求4所述的疫苗，其特征在于：所述龋齿为由S.Mutans感染所致的龋齿。
6.权利要求1所述疫苗的制备方法，其特征在于：用如下1）或2）或3）所示的蛋白质作为活性成分，与药物可接受的辅剂组合：
1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
2)在序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且与预防龋齿相关的由1）衍生的蛋白质；
3）序列表中序列2中第9位至第419位所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
7.权利要求5所述疫苗的制备方法，包括如下步骤：
（1）通过PCR方法，从S.mutans UA159基因组扩增smu_862基因片段；
（2）将所述smu_862基因片段构建到含有GST基因的表达载体上，与GST形成融合基因，测序鉴定，得到重组质粒；
（3）将所述重组质粒转化表达菌，诱导表达重组融合蛋白并鉴定；
（4）纯化所述重组融合蛋白，通过酶切去除GST纯化标签后得到疫苗抗原蛋白；
（5）将所述疫苗抗原蛋白与粘膜佐剂LTS63K混合，即得到所述预防龋齿的疫苗。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：
所述步骤（2）中的含有GST基因的表达载体为pGEX-6P-2质粒；
所述步骤（3）中的表达菌为E coli BL21(DE3)。
9.一种蛋白在制备预防龋齿的疫苗中应用，所述蛋白为如下1）或2）或3）所示：
1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
2)序列表中序列2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且与预防龋齿相关的由1）衍生的蛋白质；
3）序列表中序列2中第9位至第419位所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：
所述龋齿为由S.Mutans感染所致的龋齿。
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