[发明专利]一种无流式细胞盒的流式细胞仪装置和方法

权利要求书

1.在流式细胞仪中，使用对库尔特微孔的共轴平行照明方法，从而彻底摒弃了世界上现有主流流式细胞仪中所必不可少的昂贵的流式细胞盒和复杂的流体聚焦系统，它使光散射和荧光的探测可以直接应用于经典的库尔特微孔，其特征在于，将照明光束传播方向的光轴与库尔特微孔的轴线同轴。

2.根据权利要求1所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，所述照明光束的照明光源，可以是下列任一种或几种：激光器、发光二极管(LED)，气体放电光源、自灼光源；所述激光器可以是下列任一种或几种：气体激光器，如He-Ne激光器，Ar离子激光器，半导体激光器，光纤藕合半导体激光器，固体激光器，光纤藕合固体激光器，半导体激光泵浦固体激光器，可调谐激光器，光纤激光器。

3.根据权利要求1所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，所述照明光束的照明光源的波长范围，根据不同的应用，可以从紫外、可见到红外波段中的一种或几种。

4.根据权利要求1到3任一所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，当照明光束沿库尔特微孔轴传播时，光束聚焦到均匀地充满整个库尔特微孔。

5.根据权利要求1到3任一所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，当使用的光源为激光器时，聚焦激光束在焦点处的光腰大小略小于库尔特微孔的直径，而其瑞利范围(Rayleigh Range)则大于几个库尔特微孔的长度。

6.根据权利要求1所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，为使库尔特原理的微孔池能形成光束的通道以照明库尔特微孔和探测光信号，微孔管改造成把微孔池分隔为两部分的微孔板，并在微孔池相对微孔的前后开两个光学窗口。

7.根据权利要求6所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，所述微孔池相对微孔的前后的两个光学窗口，每一对所述光学窗口可以是一对光学平板、一对透镜或其它光学元件。

8.根据权利要求1、4和5所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，整个库尔特微孔区为探测敏感区，探测敏感区可以包括整个库尔特微孔，也可以是微孔的中部、微孔的前部、微孔的后部，或微孔的几个部分的组合。

9.根据权利要求1和8所述的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，信号探测系统具有只对某特定空间区域敏感，即只对探测敏感区中的粒子产生的光散射信号有响应，对探测敏感区外的粒子，即使处于照明光束中，其所发出的光散射和荧光信号也不能到达光电探测器。

10.根据权利要求9的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，只对某特定空间区域敏感的信号探测系统可以是光学的、机械的、电子学的、光-电的、光-机的、及以上几种的结合的方法，或其它可以达到对某特定空间区域敏感的任何方法加以实现。

11.根据权利要求9的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，具有对空间特定区域选择性接受散射光和荧光信号的特点，从而实现了后向光散射信号和后向荧光信号的成功探测。

12.根据权利要求9和11的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，对前向、后向散射光信号和荧光信号的探测，可以是对不同角度区间，或几个不同角度区间的组合的探测。

13.根据权利要求9、11、12的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，前向的光信号包括前向散射光、轴向光损失(Axial Light Loss，简称ALL)和前向荧光等信号。

14.根据权利要求9、11、12、13的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，对前向、后向散射光和荧光信号的探测，可以是单波长的探测，也可以是多波长光谱仪分光探测。

15.根据权利要求9、11、12、13的流式细胞仪中库尔特微孔的共轴平行照明方法，其特征在于，也可以在前向、后向进行单色或多色的荧光信号探测，或非弹性光散射信号，如拉曼散射、反斯托克斯拉曼散射等的信号探测。