[发明专利]一种富集鲍曼不动杆菌的培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种富集细菌的培养基，特别涉及富集鲍曼不动杆菌的培养基。

背景技术

鲍曼不动杆菌是一类广泛分布于自然环境和医院中的非发酵条件致病菌，存在于人体的皮肤、口腔、呼吸道、胃肠道和泌尿道等。由于该菌一般只引起免疫功能下降者生病，因此常被认为是非致病菌或条件致病菌。近年来其导致的感染在不断增多，且耐药性日益严重，已引起临床和微生物学者的严重关注。

鲍曼不动杆菌是属于不动杆菌属的一个菌种，它是一种不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的革兰氏阴性杆菌。菌体大小为1~1.5μm×1.5~2μm，无芽胞无鞭毛，需氧，可在普通培养基上生长良好，最适温度37℃，但41~44℃条件下亦能生长。在血平板上经18~24h的孵育可形成圆形、灰白色、光滑的菌落。而且鲍曼不动杆菌具有复杂的抗原构造，包括菌体抗原以及荚膜抗原，根据抗原的不同可以将鲍曼不动杆菌分为34个血清型。近年来研究发现鲍曼不动杆菌可降解废水中的某些污染物质，具有很高的研究和应用价值。

鲍曼不动杆菌的推广和应用，关键在于需要合适的培养基质，采用目前经典的用于富集鲍曼不动杆菌的常规培养基，其平均富集时间为35～45h，周期长。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种富集鲍曼不动杆菌的培养基，用本发明的培养基培养鲍曼不动杆菌，培养速度快，成本低。

本发明采用的技术方案是：一种富集鲍曼不动杆菌的培养基，由基础培养基、酵母膏和羟基丁二酸（苹果酸）组成；每1000ml基础培养基加入0.5g～4.0g的酵母膏和0.5g～2.0g的羟基丁二酸。

优选的，每1000ml基础培养基加入2.5g的酵母膏和1.5g的羟基丁二酸。

基础培养基是鲍曼不动杆菌的常用培养基。可以选用现有技术中经常用的，并已公开的鲍曼不动杆菌培养基。

利用上述的培养基富集培养鲍曼不动杆菌的方法：调节上述培养基的pH至7.0～7.2，121℃灭菌30min，将鲍曼不动杆菌按5％的接种量接种于培养基中，振荡混匀，置于恒温培养箱中于温度30℃下培养。

酵母膏对鲍曼不动杆菌的生长量的影响随着酵母膏的浓度的增加而增加，经过28h的光照培养后，当酵母膏的用量为2.5g/L时（每1000ml基础培养基加入2.5g），其菌体繁殖速度很快，菌液OD₆₀₀达1.9，当酵母膏的用量小于2.5g/L时，菌液OD₆₀₀小于1.9。因此，酵母膏的用量以2.5g/L的酵母膏为宜。

羟基丁二酸对鲍曼不动杆菌的生长量的影响，随着羟基丁二酸的浓度的增加而增加，经过28h的光照培养后，当羟基丁二酸的用量为1.5g/L（每1000ml基础培养基加入1.5g）时，其菌体繁殖速度很快，菌液OD₆₀₀达1.9，当羟基丁二酸的用量大于1.5g/L时，菌液OD₆₀₀小于1.9。因此，羟基丁二酸的用量以1.5g/L为宜。

本发明的有益效果是：

1. 富集培养速度快。由于在基础培养基中加入了酵母膏、羟基丁二酸等营养成分，为鲍曼不动杆菌创造了一个更好的营养条件，使鲍曼不动杆菌生长速度快，培养28h后，培养其OD₆₀₀达到1.9左右。

2. 鲍曼不动杆菌生长期延长，最大生长量提高。随着培养时间的增加，菌液OD₆₀₀逐渐增加，培养28h时，其OD₆₀₀为1.9，比使用基础培养基培养鲍曼不动杆菌时的OD₆₀₀有所提高，培养30h时，菌液生长量达最高峰，鲍曼不动杆菌的最大值提前了5～7小时，对其繁殖更有促进作用。

附图说明

图1是本发明与常规培养基，在培养基富集培养过程中，光密度OD₆₀₀的变化图。

图中，a代表常规培养基，b代表本发明的培养基。

具体实施方式

实施例1

（一）富集鲍曼不动杆菌培养基的配制

基础培养基：磷酸氢二钾3.8g、磷酸二氢钾1g、氯化钠 1g、氯化铵 0.1g、硫酸镁 0.2g、葡萄糖2g，用蒸馏水配成1000ml。

在上述基础培养基中，加入2.5g酵母膏和1.5g羟基丁二酸。

（二）鲍曼不动杆菌的培养

将上述培养基的pH调至7，121℃灭菌30min。将鲍曼不动杆菌按5％的接种量接种于培养基中，振荡混匀，置于恒温培养箱中培养，温度30℃。