[发明专利]一种利用菌丝球作为生物载体固定化光合细菌的方法无效
申请号: | 201210189557.5 | 申请日: | 2012-06-11 |
公开(公告)号: | CN102703413A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 董怡华;冯治宇;林静雯;张玉革;高丹 | 申请(专利权)人: | 沈阳大学 |
主分类号: | C12N11/00 | 分类号: | C12N11/00 |
代理公司: | 沈阳技联专利代理有限公司 21205 | 代理人: | 赵越 |
地址: | 110044 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 菌丝 作为 生物 载体 固定 光合 细菌 方法 | ||
1.一种利用菌丝球作为生物载体固定化光合细菌的方法,其特征在于,该方法包括如下具体步骤:
(1)将葡萄糖0.1~20克,蛋白胨0.1~20克,KH2PO4 0.1~10克,MgSO4·7H2O 0.01~10克加入到1000毫升蒸馏水中,用质量分数为10%的NaOH和10%的HCl调节pH 5.0~10.0,搅拌均匀,即为富集培养基;
(2)配制100毫升富集培养基,倒入250毫升的锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌115℃,30分钟,取出锥形瓶冷却至室温,用接种环移取2环实验室冰箱保存的光合细菌至锥形瓶内,用无菌玻璃球将光合细菌打散、混匀,取出玻璃球,用黑布将锥形瓶周围包好,将锥形瓶置于空气浴振荡器中进行好氧黑暗培养,培养3天后备用,即得光合细菌种子液;
(3)用无菌水冲洗长有青霉菌孢子的斜面固体培养基的表面,并用接种环轻刮斜面,将冲洗后的含有青霉菌孢子的悬浮液用移液管移至锥形瓶中,添加无菌水使得每毫升悬浮液中含有青霉菌孢子约106个,然后轻轻摇晃锥形瓶,使其中的孢子呈均匀分散状态,即得孢子悬液;
(4)配制50~100毫升富集培养基,倒入250毫升的锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌115℃,30分钟,在冷却后的锥形瓶中按1:1~5的比例同时接种体积分数为1~25%的孢子悬液和体积分数为1~25%的光合细菌种子液,然后将锥形瓶置于温度15~40℃、转速60~200转/分钟的空气浴振荡器中培养2~7天,即获得青霉菌与光合细菌形成的混合菌丝球。
2.根据权利要求1所述的一种利用菌丝球作为生物载体固定化光合细菌的方法,其特征在于,所述葡萄糖为蔗糖,可溶性淀粉,乙酸钠,蛋白胨为酵母膏,马铃薯,NaNO3。
3.根据权利要求1所述的一种利用菌丝球作为生物载体固定化光合细菌的方法,其特征在于,所述培养温度控制在-10~60℃、空气浴振荡器转速控制在100~200 转/分钟。
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