[发明专利]黑曲霉及其在微生物制备（R）-环氧叠氮丙烷中的应用

权利要求书

1.黑曲霉（Aspergillus niger）208，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏日期2012年5月9日，保藏编号CCTCC NO：M  2012163。

2.如权利要求1所述的黑曲霉208，其特征在于所述黑曲霉208的18SrDNA部分核苷酸序列如下：

CGAGTGCTGCTACTGATCCGAGGTCACCTGGAAGAATGGTTGGAAAACGTCGGCAGGCGCCGGCCAATCCTACAGAGCATGTGACAAAGCCCCATACGCTCGAGGATCGGACGCGGTGCCGCCGCTGCCTTTCGGGCCCGTCCCCCCGGAGAGGGGGACGGCGACCCAACACACAAGCCGGGCTTGAGGGCAGCAATGACGCTCGGACAGGCATGCCCCCCGGAATACCAGGGGGCGCAATGTGCGTTCAAAGACTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTAGTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCCGGAACCAAGAGATCCATTGTTGAAAGTTTTAACTGATTGCATTCAATCAACTCAGACTGCACGCTTTCAGACAGTGTTCGTGTTGGGGTCTCCGGCGGGCACGGGCCCGGGGGGCAGAGGCGCCCCCCCGGCGGCCGACAAGCGGCGGGCCCGCCGAAGCAACAGGGTACAATAGACACGGATGGGAGGTTGGGCCCAAAGGACCCGCACTCGGTAATGATCCTTCCGCAGGTACCCTTACGGAA。

3.如权利要求1所述的黑曲霉208在微生物法制备（R）-环氧叠氮丙烷中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述应用为：以外消旋环氧叠氮丙烷为底物，以黑曲霉208的湿菌体细胞为催化剂，25~40℃下，于pH 6.0~8.4的缓冲液中反应1~12小时，制得所述（R）-环氧叠氮丙烷。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述缓冲液中，黑曲霉208湿菌体细胞的初始浓度为100~1000g/L，底物外消旋环氧叠氮丙烷的初始浓度为0.1~20g/L。

6.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述缓冲液为下列之一：磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、巴比妥缓冲液。

7.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述缓冲液中还添加有体积为缓冲液体积5~20%的助溶剂，所述助溶剂为下列之一：（1）二甲基亚砜、（2）丙酮、（3）N,N-二甲基甲酰胺、（4）二唑烷、（5）四氢呋喃。

8.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述黑曲霉208湿菌体细胞由如下方法获得：培养基的终浓度组成：可溶性淀粉5~30g/L，黄豆粉5~20g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.2~1g/L，KH₂PO₄ 0.1~0.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.1~1g/L，NaCl 2~10g/L，溶剂为水，pH 6~8；上述培养基接种黑曲霉Zjutzq208，25~40℃、100~200rpm振荡培养48~96小时，培养液离心取沉淀经生理盐水洗涤，收集得到所述黑曲霉208湿菌体细胞。