[发明专利]一种丹红注射液质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药复方制剂丹红注射液质量控制方法，具体地说是用指纹图谱结合高效液相色谱（HPLC）多指标成分含量测定的方法来控制丹红注射液的质量。

背景技术

丹红注射液系由丹参、红花两味药材经提取、浓缩、醇沉、水沉、制剂等工艺制成的中药注射剂，主要用于治疗心绞痛、心肌梗塞、动脉粥样硬化等心脑血管疾病。其具有起效快、疗效好等功效，目前已广泛应用于临床。但由于原药材质量不均、工况波动等因素，常导致产品批次间差异，难以实现丹红注射液质量稳定、均一可控的目标。因此，如何建立一种较综合、全面的丹红注射液质量评价方法，从而保证产品质量的进一步升级，显得十分重要。

现行《部颁》标准对丹红注射液质量评价除常规制剂检查项目外，含量测定项只要求总黄酮和注射剂中丹参素钠和原儿茶醛等几个指标成分。总黄酮含量测定采用亚硝酸钠——硝酸铝显色法，而注射液中酚酸类化合物，如丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B等均对该显色方法有响应，方法专属性不强，无法真实反映注射液中主要药效群体含量。此外，丹红注射液液相含量测定也只针对其中丹参素钠、原儿茶醛等一两个化学成分进行表征和控制。然而，中药往往是由众多化学组分所组成的复杂物质体系，传统的测定一个或几个化学成分含量的方法无法对中药质量做出整体分析。

以指纹图谱作为中药提取物及其制剂的质量控制方法，目前已成为国际共识。美国食品药品管理局（FDA）允许中草药保健品申报资料中提供色谱指纹图谱；世界卫生组织（WHO）在1996年草药评价指导原则中也规定，如果草药的活性成分不明确，可以提供色谱指纹图谱以证明产品质量一致；欧共体（EU）在草药质量指南中亦称，单靠某种有效成分考察质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。2001年，国家药品监督管理局颁布《中药注射液及指纹图谱研究的技术要求》（暂行）要求将指纹图谱检测指标及技术要求作为质量标准的单列项目，从而对中药质量控制方法进行了有益补充。中药指纹图谱的建立不仅能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类和数量，进而对药品质量进行整体描述和评价，同时，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。

目前，中药指纹图谱研究比较主流的方法是色谱法包括薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法等。薄层色谱由于重现性及精密度差，主要用于中药的鉴别；气相色谱主要用于分析易挥发性化学成分中药；而液相色谱由于其分析效能高、重现性好、灵敏度高等特点在中药指纹图谱中得到最为广泛的应用。特别是近年来，多种技术的联用，更是使指纹图谱的分析手段从单维走向多维。多维的指纹图谱分析技术主要有HPLC/MS/MS和HPLC/DAD，HPLC/MS/MS因价格昂贵，在中药质量控制中推广尚存在一定困难；而HPLC/DAD不仅简单，易于普及，同时能够尽可能多的提供中药色谱和光谱信息，十分适合于指纹图谱分析。

在实际应用领域，指纹图谱作为一种综合、全面的质量控制技术已有相关专利，如（CN102323345.2，CN201110073973.4，CN201110072539.4，CN201010108838.4）。目前，指纹图谱定性相似度主要采用夹角余弦算法，该法的原理是将每个样品指纹图谱看做一个向量计算供试品指纹向量和对照指纹向量之间的夹角余弦值，但该法不具有定量性质，同时存在着大峰掩盖小峰问题；程翼宇等（程翼宇等，化学学报，2002，60(17)：2018）提出采用相关系数法，其公式为相关系数法可以从整体上判断指纹图谱的相似度，但该法经常存在对样品不敏感，计算结果相似度偏高的问题；孙国祥（孙国祥等，药学学报，2007，42(1)：75）在此基础上提出了一种更为优秀的评价方法，即对对照指纹图谱作样品作计算与间夹角余弦值，该方法的优点在于能够消除大峰的影响，对各峰具有等权性。定量相似度方面，孙国祥等也提出了一种计算定量相似度P(P=S_F·R，其中R为样品与对照指纹图谱共有指纹峰总积分面积之间的比值；S_F为夹角余弦值)的方法。该法在用于评价指纹图谱定量相似度时，虽然考虑了不同组分的比例，但只在S_F较低时影响明显。定量相似度其中为样品与对照指纹图谱中第i个特征峰的积分面面积之间的比值)则将每个共有峰看作相对独立的整体，通过计算样品全部共有峰与对照指纹图谱特征峰接近程度，是一种更为优秀的比较方法。