[发明专利]防治桃小食心虫的白僵菌制剂及其制备方法无效
申请号: | 201210184231.3 | 申请日: | 2012-06-06 |
公开(公告)号: | CN102690760A | 公开(公告)日: | 2012-09-26 |
发明(设计)人: | 熊琦;高英;张艳峰;李捷;范仁俊;曹天文;谢映平;薛皎亮 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/04;A01N25/12;A01P7/04;A01G13/00;C12R1/645 |
代理公司: | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人: | 杨耀田 |
地址: | 030006 山*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 防治 食心虫 白僵菌 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种白僵菌,其菌种保藏号为CGMCCNo.4526。
2.一种防治桃小食心虫的白僵菌制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)一级斜面菌种培养:将保藏号为CGMCC No.4526的球孢白僵菌菌种接入装有含健康桃小食心虫虫尸浸出液的PDA斜面培养基的试管中,放入培养箱,在温度为20℃-28℃、相对湿度为70%-85%条件下培养,待菌丝长满斜面并产满孢子时备用;
(2)二级菌种培养:在无菌条件下,将培养好的一级斜面菌种连同培养基一起刮下,放入含有液体培养基的三角瓶中培养,接种量为每一试管菌种接种3瓶,将接种后的三角瓶放入恒温震荡培养箱,20℃-28℃、150-200r/min,培养至培养液中长满菌丝球时备用;
(3)三级固体扩大培养:在无菌条件下,将二级菌种,按体积比为1∶10-25的接种量接入灭过菌的固体培养基中,在温度为20℃-28℃、相对湿度为70%-85%条件下培养,至培养基上长满白色菌丝,即得三级培养物;
(4)菌粉制剂制备:将原料按重量百分比计麦麸60-80,谷壳20-40(优选:麦麸70,谷壳30)混匀,并按原料总重量加水60%-80%搅拌均匀,灭菌,冷却至室温后,即得填料;将填料与三级培养物按1-3∶1比例在无菌室内搅拌均匀,分装,即得白僵菌菌粉制剂;
所述的液体培养基为SDAY培养基;
所述的固体培养基通过如下方法制得:按重量百分比计,将原料麦麸68-72,谷壳26-30,奶粉1-4混匀,并加入原料总重量60%-80%的水,搅拌均匀,灭菌制得。
3.如权利要求2所述的一种防治桃小食心虫的白僵菌制剂的制备方法,其特征在于,所述的含健康桃小食心虫虫尸浸出液的PDA斜面培养基配比为:马铃薯200g/L,葡萄糖20g/L,琼脂20g/L,桃小食心虫幼虫干虫尸10g/L。
4.如权利要求2所述的一种防治桃小食心虫的白僵菌制剂的制备方法,其特征在于,所述的固体培养基中原料按重量百分比计:麦麸70,谷壳28,奶粉2。
5.如权利要求2所述制备方法制得的白僵菌制剂的施用方法:在发生桃小食心虫的树根基部外围1米左右的1-2cm厚的表层土拨开,将白僵菌菌粉制剂与土壤按1︰0.5-1.5比例拌匀后均匀撒施,然后再将表层土盖好即可;用量为150-250g/株,施用时间为桃小食心虫将要脱果入土越冬前。
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