[发明专利]一种食品中双酚A和双酚AF的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食品中双酚A和双酚AF的快速检测方法，属于分析化学技术领域，更具体的是采用液液分散微萃取-高效液相色谱法对塑料包装食品中双酚A和双酚AF进行测定。

背景技术

双酚A，（Bisphenol A，简称BPA）一种化工原料，能大大加强环氧树脂、聚碳酸酯和不饱和聚酯树脂等高分子材料的透明性和耐用性。广泛用于包装材料、橡胶防老材料、农药和婴儿用品等的生产中，而且其在生产和使用过程中大量流入环境。双酚A具有雌激素的作用，能干扰正常激素在机体内的产生、释放、运输和代谢的作用，能导致内分泌紊乱，诱发早熟、肥胖、生殖等健康问题，甚至能大大增加患前列腺癌及乳腺癌的风险，胎儿更易受其影响而致畸。另外，其物理和化学性质较为稳定，难以降解，一旦摄取难以在体内代谢。随着不良事件的发生，如“含双酚A的婴儿奶瓶”事件，其安全性问题成为国内外关注的焦点。同样，双酚AF（BPAF）可以诱导前列腺细胞增殖，也可促进人乳腺癌细胞MCF-7的增殖，Coleman等人已经证实双酚AF同样可以与雌激素受体结合，产生类雌激素效应。然而，市面上普通食品中双酚A和AF含量较低（通常在30～100 μg/(Kg或L)范围内），并且这些产品还存在很多其他物质，这给双酚A 和AF 的分析测定带来了的困难，因此建立高灵敏度、快速、高选择性和准确的双酚A 和AF的测定方法具有重要的现实意义。

双酚A结构式如下：

   双酚AF结构式如下：

目前国内外文献报道双酚A 和AF检测方法主要有色谱法、电化学法、荧光法、化学发光法、免疫分析法及联机技术法等，其中电化学法、荧光法、化学发光法和免疫分析法操作繁琐耗时、成本高、回收率较低及人为因素影响较大，而且检测限较高，如CN 101533014 A报道采用免疫法测定双酚A的最低检出限高达5 mg/Kg，以上方法主要是因为没有对样品进行前处理富集，而且样品双酚A的含量较低，检测准确度不足，检测限较高。色谱法及联机技术能准确定量和定性，然而样品成分复杂，含量较低，必须经前处理富集才能进入色谱柱和质谱仪进行定量和定性，因此前处理是样品分析最重要的环节，它决定了检测方法的灵敏度和可行性。相关文献报道了双酚A 和AF的样品前处理技术多采用固相萃取（SPE）和浊点萃取法（CPE）等方法，其中SPE技术以效率高，稳定可靠及溶液用量少等优势成为双酚A 和AF分析的主要处理方法，但SPE技术也存在萃取柱造价高，操作耗时；而CPE技术同样具有快速高效的优点，但相关的文献报道较少，一些关键的技术还在研究当中。

液液分散微萃取（DLLME）技术具有操作简单、快速、费用低、对环境友好、回收率和富集倍数高、检测限低等优点，得到广泛应用，文献报道应用DLLME技术处理的样品大多数为简单基质（如水样等），而选离子液体做萃取剂结合超声和温控萃取对食品的测定鲜有报道。 

发明内容

本发明提供一种食品中双酚A和双酚AF的快速检测方法，样品前处理采用离子液体（1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐）做萃取剂，Triton X-100或丙酮为分散剂进行液液分散微萃取，方法中首先对样品进行预处理，然后将萃取剂和分散剂加入经预处理的样品中，混匀，超声乳化萃取，离心，分离下层液滴，按前述方法对上层液再萃取一次，合并两次萃取液滴后进行HPLC分析。本发明具有快速、灵敏和简单及检测成本低等优点，可用于食品中双酚A 和AF的快速检测。 

本发明是通过如下具体技术方案实现本发明目的：

（1）        样品预处理：

A、固体样品：10.0～15.0 g固态食品中加入40～50 mL乙醇溶液（80～90%，V/V），超声提取40～45 min（超声频率为110～120 KHz），提取液减压浓缩至干，加入10.0～15.0 g蒸馏水，混匀，2500～4000 rpm离心5～10 min后取上清液调pH至6.0～7.0，再于1500～2000 rpm离心3～5 min除去其中的悬浮物，取上清液备用；

B、液体样品：取10.0～15.0 g液体样品在2500～4000 rpm离心5～10 min，离心后取上清液调节pH为6.0～7.0，再于1500～2000 rpm离心3～5 min，取上清液备用；