[发明专利]一种鲑鳟鱼三倍体苗种的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产生物育种技术领域，具体地涉及鲑鳟鱼的一种杂交三倍体苗种的制备方法。

背景技术

鲑鳟鱼是目前世界上主要养殖的鱼类之一，自然条件下它们多生长于常年水温不超过20℃、水质为贫营养性、没有化学污染和有机污染的低温泉水或清澈的溪流中，因此又称之为冷水性鱼类。由于鲑科鱼类对生存水质有非常高的要求，略有污染即无法生存，所以鲑鳟鱼体干净，无任何污染，是名副其实的无公害绿色食品，吃起来放心。另外，鲑鳟鱼是一种高蛋白、高脂肪、低胆固醇(胆固醇含量微乎其微)的鱼类。和其它鱼相比，鲑鳟鱼含有一般鱼类所缺乏的甘氨酸，维生素A、B的含量也高于其它鱼类，微量元素铁的含量更是其它鱼类所不及。鲑鳟鱼肉质鲜嫩，无邪味，无腥味，无需刮鳞，人每周吃两次鲑鳟鱼就可以预防血栓病的发生。意大利专家一项最新的研究结果表明，吃含有鲑鳟鱼的保健品能够大幅度减少心脏病患者突然死亡的风险。每天吃1克用鲑鳟鱼鱼油提炼的DHA，将会减少心脏病发作时突然死亡的风险。因此，鲑鳟鱼是一种肉质鲜美且具有保健价值的鱼类。由于其自身的品质和对生活环境的特殊要求，决定了它绿色、环保营养食品的性质，因此颇受消费者的青睐。鲑鳟鱼是我国目前主要的冷水性养殖鱼类，由于长期近亲繁殖、缺乏系统选育等原因，导致养殖个体出现了性早熟、个体小型化、病害滋生等问题，不能满足消费者对大规格鲑鳟鱼的需求，造成养殖效益下降。

研究表明：虹鳟鱼三倍体具有可将能量全部用于体细胞生长，从而提高饵料转化率，在幼鱼期和成熟期三倍体普遍比二倍体生长快；避免了性腺发育阶段和产卵季节因能量转移和婚姻色出现而导致的鱼肉品质下降及表观特征变化；抗病能力较二倍体更强(水霉病、IHN病毒病)等优点，已成为国内外水产科学工作者的研究热点，自上世纪80年代以来，三倍体鱼类的人工诱导工作取得了长足进展。

国内对鲑鳟鱼三倍体苗种制备的研究主要集中在纯种虹鳟鱼的三倍体制备，其方法为热休克法或静水压方法。现有热休克方法制备纯种三倍体虹鳟鱼的技术是当在26.5℃的条件下，受精卵发眼率为67.80％-70.28％，鱼苗三倍体率能够达到50％-65％；当在28℃条件下，受精卵发眼率为29.78％-32.75％，鱼苗三倍体率能够达到80.95％-83.18％；在30℃条件下，能够得到非常高的三倍体率，达到90％以上，但其发眼率通常不超过10％，且苗种畸形率高，始终无法形成规模化生产，其原因为现有的纯种生产三倍体苗种制备技术或无法达到生产要求的三倍体率或无法达到可用于生产的苗种成活率。因此，迫切需要一种技术成熟的鲑鳟鱼三倍体育苗技术，提高受精卵的发眼率和苗种三倍体率，从而实现鲑鳟鱼杂交三倍体苗种的规模化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鲑鳟鱼杂交三倍体苗种制备方法，以克服现有技术的不足。

本发明提供的鲑鳟鱼三倍体苗种的制备方法，包括以下步骤：

(1)鳟鱼亲鱼卵子与鲑鱼亲鱼精子进行杂交；

(2)热休克法处理受精卵；

(3)降温处理受精卵；

(4)受精卵在养殖用水中孵化。

本发明的鲑鳟鱼杂交三倍体苗种的制备方法，优选鳟鱼亲鱼为硬头鳟，鲑鱼亲鱼为北极红点鲑。

进一步地，本发明方法的步骤(1)杂交前按照常规方法使亲鱼同步发育成熟，硬头鳟亲鱼培育水温为10-13℃，流水池水交换量为2h/次；北极红点鲑亲鱼培育水温为8-10℃，流水池水交换量为4h/次。

本发明方法中，所述步骤(1)采用挤压法将鱼卵取出；精液用孵化用水清洗，方法为精液与孵化用水的体积比为1-1.5∶2500-3000，搅拌0.5-1.5min后倒掉水，同样方法反复冲洗3-5次。

本发明方法中，所述步骤(2)热休克法处理方法为：鱼卵受精14-16min后，将受精卵迅速移入17.5-18.5℃水体中预热4-6min；之后迅速移入25.5-26.5℃水体中，处理19-21min。

本发明方法中，所述步骤(3)降温处理方法为：将步骤2)热处理的受精卵迅速移入17.5-18.5℃水体中，降温处理时间为4-6min。

本发明方法中，所述步骤(4)受精卵的孵化条件为5-13℃水体孵化55-65天。