[发明专利]一种猪免疫力分子遗传标记及其应用

说明书

技术领域

本发明属于动物分子遗传标记制备技术领域，具体涉及一种用miR-155前体侧翼序列预示和鉴定猪免疫力的分子标记的制备和应用。 

背景技术

在现代集约化饲养方式下，疾病特别是传染病成为制约养猪业健康、持续、稳步发展的主要因素。虽然通过采取加强饲养管理、改善环境卫生条件、应用药物和疫苗进行治疗和预防等措施使疾病得到了一定的控制，但从长远来看，采用育种措施从遗传角度提高猪群抗病力，才能使养猪业真正远离疾病的困扰。个体免疫力是衡量动物抗病能力的重要指标，阐明免疫性状的遗传机制，挖掘出具有重大育种价值的关键基因，在此基础上寻找可行的分子标记，并在生产中应用，成为分子抗病育种研究的重点之 

畜禽免疫性状是受多基因控制的数量性状，目前对猪分子抗病育种的研究主要集中在以下三个方面： 

(1)猪抗病性状的QTL研究。 

研究发现在SSC9，5，6，13存在猪伪狂犬病毒易感或抗性QTL；在SSC1，8存在影响白细胞数量、血细胞容积、白细胞介素2(interleukin2，IL2)和α干扰素(interferonα，IFNα)分泌量等免疫指标的QTL；在SSC7存在猪肉孢子虫的易感或抗性QTL；在SSC5，7，8，12，13存在红细胞性状QTL。最近的研究发现发现猪1、2-4、6-8、12、15、16和18号染色体存在控制免疫性状的QTL。 

(2)猪抗病性状的候选基因研究。 

目前研究较清楚的是猪大肠杆菌K88和F18受体基因。国内学者也对这类基因进行了一定程度的研究。此外，选择与免疫应答相关的基因， 如干扰素(iterferon，IFN)及其受体基因、猪白细胞抗原复合体(swine leukocyte antigen，SLA)及其抗原呈递基因、白细胞介素(interleukin，IL)、Toll样受体(Tolllike receptors，TLRs)、自然抗性相关巨噬蛋白1(natural resistance-associated macrophage protein1，NRAMP1)基因和Mx1等基因作为免疫性状的候选基因，进行相应的研究。 

(3)病(抗)原诱导的宿主基因表达(谱)研究。 

Petry等测定了用猪繁殖与呼吸综合症病毒处理不同品系猪后各品系个体的肺组织和支气管淋巴结中免疫基因的表达谱，发现白细胞介素8(interleukin8，IL8)可能是一个候选抗性基因。Zhao等利用基因芯片对正常猪与沙门氏菌感染猪的肺组织基因表达谱进行了研究，发现转谷氨酰胺酶基因家族基因(transglutaminase family genes，TFG)，IFNs诱导基因(GBP1，GBP2，C1S，C1R，MHC2TA，PSMB8，TAP1，TAP2)等在感染前后表达差异显著。为了寻找新的免疫性状候选基因，国内外研究者利用mRNA差异显示技术和基因芯片技术从猪免疫细胞和器官中分离出一批新基因。目前，这些差异基因作为抗病育种候选基因的相关研究正在进行。 

虽然猪分子抗病育种研究已取得一定的成果，但目前鉴定的候选基因无法满足抗病育种的需要。由于构建用于抗病性状QTL定位的资源家系成本高、难度大，因此，利用候选基因法挖掘抗病性状的遗传标记仍将是猪分子抗病育种研究的重要内容。 

miR-155第一个被发现的参与免疫调控的miRNA。基因敲除研究发现，miR-155基因敲除小鼠与正常小鼠相比，抗细菌感染能力差、抗体滴度低、T细胞反应水平低。进一步研究发，敲除miR-155导致其它基因的活性发生改变，不能进行有效的免疫反应，容易发生自身免疫和感染。