[发明专利]从黄芪中同时提取和分离黄酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中草药有效成分的提取方法，尤其涉及一种从黄芪中同时提取和分离黄酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法。

背景技术

黄芪是名贵中药，属补气药，具有补气升阳、益胃固表、利水消肿、脱毒生肌等功效。黄芪为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus) 或膜荚黄芪(Astragalus membranaceus)的干燥根，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌等功效。黄芪中的主要有效成分为黄酮类、皂苷类和多糖。其中黄酮类化合物主要包括芒柄花素( formononetin)、芒柄花苷(ononion)、毛蕊异黄酮(calycosin )及其糖苷等。研究证实黄芪总黄酮具有清除O^2-·和OH-·防止生物膜过氧化的作用，也能显著抑制OH-·对DNA的损伤作用，是黄芪抗氧化作用的主要成分，表现为显著的抗肝脏毒性、抗炎、抗菌及保护心血管系统的作用。黄芪总皂苷在免疫调节、心肌缺血保护等方面有显著活性，其药理作用广泛，包括抗病毒、保肝、抑瘤、改善心脏功能、抗炎镇痛、抑制滑膜成纤维细胞增殖等。黄芪多糖具有广泛的生物活性，在医学和兽医临床上研究应用也较广泛，可作为免疫促进剂或调节剂。大量体内外实验及临床研究表明，黄芪多糖具有增强机体免疫功能、强心降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效。

现有文献虽然报道了较为详细的将黄芪中部分有效成分进行分离的方法，但同样也没有一个将多糖、黄酮类化合物和皂苷类化合物从黄芪中同时进行分离和富集的过程。

发明内容

 本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术而提供一种从黄芪中同时提取和分离黄酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法，其工艺简单、成本低、损失小和产品质量高。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是：从黄芪中同时提取和分离黄酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法，包括以下步骤：

1）将黄芪根茎原料粉碎过20-60目筛后放入容器，加入乙醇提取，在50~90℃下回流提取1~5小时，反复提取2-3次，过滤药渣后，合并得到乙醇提取液；

2）乙醇提取液冷却至室温，静置2~7天，有沉淀物A析出，过滤得到沉淀物A和乙醇提取液过滤液；

3）待步骤1）所得药渣挥去溶剂之后用水提取1~5小时，反复提取2-3次，过滤药渣后，合并得到水提取液，旋转蒸发浓缩后，得到水提浓缩液；

4）步骤3）所得水提浓缩液用乙醇醇沉，过滤得到的沉淀物B与沉淀物A合并，真空干燥研磨成粉，即得到黄芪多糖富集物；

5）将步骤2）的乙醇提取液过滤液和步骤4）过滤所得的过滤液合并，搅拌下加入碱液，离心分离，得到黄色粘稠沉淀C；

6）将步骤5）离心分离得到的清液进行蒸馏回收有机溶剂，浓缩后的母液室温放置沉降，离心得到淡黄色沉淀D，通过蒸馏水水洗该沉淀3-5次后，将其真空干燥研磨成粉，得到黄芪总皂苷富集物；

7）将步骤5）所得黄色粘稠沉淀C加酸液酸化，至不再沉出物质为止，离心分离，所得沉淀物经水洗后，将其真空干燥研磨成粉，即得到黄芪总黄酮富集物。

按上述方案，步骤1）所述的乙醇浓度是50~95.wt%。

按上述方案，步骤1）所述的黄芪根茎与乙醇的投料比为1g∶5~30ml，步骤3）所述的挥去溶剂之后的药渣与水的投料比为1g∶5~30ml。

按上述方案，步骤4）所述的乙醇浓度为50~100.wt%。

按上述方案，步骤3）所述的旋转蒸发浓缩蒸发后体积为水提取液原体积的1/2~1/10，步骤6）所述的浓缩后母液体积为清液原体积的1/2~1/10。

按上述方案，步骤5）所述的碱液为NaOH、Ca(OH)₂或KOH以控制pH为8~10。

按上述方案，步骤7）所述的酸液为盐酸、硫酸或醋酸以控制pH为3~5。

本发明的反应机理是采用固液萃取将固体混合物浸在选定的溶剂中，利用其组分在溶剂中的不同溶解度，使易溶的组分溶解为溶液，即可达到不同机型物质与固体残渣的分离。

本发明使用碱沉淀法将黄酮类和皂苷类化合物进行分离和富集时，所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成                                                盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。

本发明所得产品的分析方法：

1、黄芪总黄酮的含量测定