[发明专利]一株短乳杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株短乳杆菌及其应用，特别是一株分离自口腔的具有益生特性的短乳杆菌，能产生保外多糖、过氧化氢及抑制口腔致病菌生长的短乳杆菌。 

背景技术

联合国粮农组织和世界卫生组织将益生菌定义为一种具有生物活性的微生物，当给予人体适当剂量后对人体的健康有益。益生菌的种类繁多，最常见的两大类益生菌分别是乳酸杆菌类和双歧杆菌类。 

随着抗生素过度使用和细菌耐药问题的日益加剧，益生菌在防治和缓解感染、炎症及过敏性疾病方面的优势越来越明显。大量的研究证实益生菌能用于治疗口咽感染、消化道疾病、泌尿生殖系统感染等疾病。近几年来益生菌疗法也逐渐应用到口腔医学领域。临床上常见的口腔疾病如龋齿、牙周炎和口臭等，都与某些致病菌或对口腔健康不利的微生物在口腔中的过量生长有关。益生菌疗法不仅可以有效抑制致病菌的生长，同时还能帮助维持正常的口腔微生态菌群，保障口腔健康。有研究表明长期摄入添加鼠李糖乳杆菌牛奶的儿童，龋病发生率较低，这是由于具有益生性的鼠李糖乳杆菌能够抑制龋齿致病菌变异链球菌的生长，减少口腔环境中变异链球菌数量，降低龋病发生率。也有研究采用益生乳杆菌制备治疗牙龈出血及牙龈炎等药物来解决口腔问题。 

口腔环境中定植有各种各样的微生物，这些微生物通过共生竞争拮抗等作用，构成了复杂的生态系统。口腔益生菌在这个生态系统中发挥作用的前提之一是能够与口腔中其他微生物共聚集及形成生物膜。此外，通过分泌过氧化氢、细菌素、有机酸等多种抗菌物质来抑制病原菌的生长也是微生物作为口腔益生菌的筛选原则。 

发明内容

本发明提供了一株短乳杆菌（Lactobacillus brevis）BBE-Y52，于2012年5月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2012162。 

本发明提供了一株口腔短乳杆菌，具有产胞外多糖、产过氧化氢和抑制变异链球菌及空肠弯曲杆菌生长的益生特性。 

所述短乳杆菌分离自口腔健康志愿者的牙菌斑。其培养和保藏条件如下：从生长良好的平 板上挑取单菌落接入MRS培养基中，在37°C（5%CO₂）培养24h后保藏于-80°C冰箱。 

所述短乳杆菌产胞外多糖的培养条件是将其接种于含有10%（w/v）蔗糖的MRS培养基中，在30°C静置培养48h。短乳杆菌所产游离的胞外多糖使用苯酚-硫酸法测定。 

短乳杆菌产过氧化氢的培养条件是将其接种到MRS培养基中，37°C 5% CO₂培养24h，用过氧化物试纸条检测发酵液中过氧化氢的含量。 

研究短乳杆菌抑制变异链球菌和空肠弯曲杆菌的生长采用牛津杯法。 

本发明提供的短乳杆菌（Lactobacillus brevisBBE-Y52），能抑制变异链球菌及其他口腔微生物的生长；能产胞外多糖，为乳酸菌在口腔环境中与其他微生物共聚集及生物膜的形成提供了必要的条件；还能产过氧化氢，具有杀菌美白牙齿的作用。短乳杆菌可以用来解决常见的口腔问题，保障口腔健康。 

生物材料： 

本发明获得一株短乳杆菌（Lactobacillus brevis）BBE-Y52，于2012年5月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2012162。 

具体实施方式

实施例1：口腔乳杆菌的分离 

将唾液和牙菌斑样品稀释涂布在MRS固体培养基上（pH 5.5），在37°C（5%CO₂）培养24h。挑选革兰氏阳性的杆菌进行划线分离和保藏。 

实施例2：口腔益生乳杆菌的筛选及其益生特性 

对口腔益生乳杆菌的筛选及特性考察包括产胞外多糖、产过氧化氢和抑制三株典型的口腔微生物的生长。