[发明专利]用于检测T-2和HT-2毒素的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒无效
申请号: | 201210177240.X | 申请日: | 2012-05-31 |
公开(公告)号: | CN102766208A | 公开(公告)日: | 2012-11-07 |
发明(设计)人: | 袁宗辉;常芳芳;彭大鹏;王玉莲;陈冬梅;刘振利 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C07K16/14 | 分类号: | C07K16/14;G01N33/577 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 樊戎 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 ht 毒素 单克隆抗体 免疫 方法 试剂盒 | ||
1.一种能同时识别T-2和HT-2毒素的单克隆抗体,其特征在于,它是由保藏号为CCTCC NO:C201189的杂交瘤细胞T-2所分泌的。
2.权利要求1所述的杂交瘤细胞T-2,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:C201189。
3.权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测T-2和HT-2毒素的酶联免疫试剂盒中的应用。
4.包含权利要求1所述的单克隆抗体的试剂盒。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,该试剂盒是检测T-2和HT-2毒素的酶联免疫试剂盒。
6.权利要求4或5所述的试剂盒在T-2和HT-2毒素检测中的应用。
7.一种检测T-2和HT-2毒素的酶联免疫方法,其步骤如下:
(1)将T-2毒素与戊二酸酐反应后的产物与牛血清白蛋白偶联得到免疫原;
(2)将T-2毒素与丁二酸酐反应后的产物与卵清蛋白偶联得到包被原;
(3)利用步骤(1)的免疫原制备得到保藏号为CCTCC NO:C201189的杂交瘤细胞T-2;
(4)用保藏号为CCTCC NO:C201189的杂交瘤细胞T-2制备单克隆抗体;
(5)用步骤(2)的包被原包被固相载体;
(6)将待测样品用体积百分比为50% 的N,N-二甲基甲酰胺溶液提取、滤纸过滤、样品稀释液稀释得到待测物;
(7)对步骤(6)的待测物进行检测,
其中,
样品稀释液的组分及配比为:NaCl 8.0g, KH2PO4 0.2g,Na2HPO4.12H2O 2.9g,KCl 0.2g,加双蒸水至1000mL。
8.权利要求7所述的酶联免疫方法在T-2和HT-2毒素检测中的应用。
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