[发明专利]一株兼有高效解磷固氮及抑制病原真菌生长的产酸克雷伯氏菌

说明书

技术领域

本发明涉及一株克雷伯氏菌菌株。

背景技术

植物促生菌(planggrowth-promoting rhizobacteria PGPR）是一类寄居在植物根系周围的的微生物，以促生、营养和抗病等令人感兴趣的特点使得人们在近些年将其作为研制和开发的热点，已表现出良好的开发应用前景。对PGPR的研究主要集中在细菌分泌植物促生物质，对豆科结瘤的促生作用，对促进植物出芽的作用，对土传病害的生物调控作用等四个方面。

大量的研究证实PGPR促生菌广泛存在于多种植物的根际。目前，已从20多个种属的根际细菌中鉴定出了具有防病促生潜能的PGPR菌，其中主要包括假单孢菌属(psendomonas)和芽孢杆菌属(Bacillus)。此外，还包括产碱菌属(Alccaligenes)、节杆菌属(Arthrobacter)、固氮菌属（Azotobacter)、固氮螺菌属(Azospirillum)、肠杆菌属(Enterobacter)、欧文氏菌属(Erwinia)、哈夫尼菌属(Hafnia)、黄杆菌属(Flavobacter)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、沙雷氏菌属(Serratia)、黄单孢菌属（Xanthomonas)和慢生型根瘤菌属（Bradyrhizobium)等。

从目前整个有关PGPR相关研究来看，PGPR的促生作用主要是通过以下途径完成：生物固氮；解磷细菌促进植物对磷的吸收；嗜铁素促进植物对铁的吸收和对病原菌的抑制作用；分泌植物激素对植物根部生长和根部形态学的积极作用；促进豆科植物与根瘤菌的共生效应；促进植物与有益根际真菌（如丛枝菌根（AM））的共生等。

目前对PGPR研究侧重点仍然限于假单孢菌属和芽孢杆菌属等少数的种属，关于其他种属的报道很少，研究也不够深入。应用的菌株极少具有多种功能集于一体的，我国的PGPR的应用基础研究十分薄弱，函待加强。随着生物技术的不断发展，广谱性和适应能力强的优良菌株的选育，PGPR的最佳培养基配方、制剂的最佳类型，应用的合理剂量，与杀虫剂、除草剂、杀线虫剂配合施用等一系列的问题将逐一得到解决。微生物制剂由单一功能向多功能发展(如肥药合一)，与矿质元素或有机养分的合理复合等，也是当前一个研究和发展趋势。拓宽PGPR菌株的研究范围，筛选优良高效的PGPR菌株，PGPR高效培养物的获得，将是PGPR研究的新领域与新课题。此外，新型PGPR的组成和生产工艺复合菌剂的研制、开发和应用是目前微生物制剂一个热点方向。

发明内容

本发明提供了一株克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）ASP-15菌株，具有营养和促生作用，具有较高的解磷、固氮作用，还对多种植物病原真菌具有抑制作用，具有ACC脱氨酶，分泌铁载体的能力。

本发明的一株兼有高效解磷固氮及抑制病原真菌生长的产酸克雷伯氏菌，它为产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）ASP-15，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2010年12月17日，保藏号为CGMCC No.4488。。

本发明产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）ASP-15为革兰氏阴性菌，短杆状，长为0.3~1.5μm×0.6~6.0μm，宽为0.3~0.4μm，单个或成短链状排列，有荚膜，无芽孢，革兰氏反应阴性（G-）；在牛肉膏蛋白胨培养基上为圆形，稍呈半球形，直径为2~4mm，闪光，乳白色至淡黄色，边缘整齐粗糙，最适生长温度：28~30℃，最适生长pH为7.0~7.2。

本发明的产酸克雷伯氏菌ASP-15可利用蔗糖、海藻糖、甘露醇、葡萄糖、甘油、麦芽糖、乳糖等作为碳源及蛋白胨、酵母粉、玉米浆、硫酸铵、磷酸铵作为氮源生长。

本发明的产酸克雷伯氏菌ASP-15明胶水解试验阴性，吲哚试验阴性，V．P反应阳性，M．R反应阴性。

本发明的产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）ASP-15通过16SrDNA序列比对分析，与克雷伯氏菌属（Klebsiella）的16SrDNA序列的同源性最高，相似性为99%，通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果确定产酸克雷伯氏菌ASP-15属于克雷伯氏菌（Klebsiella），为产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）ASP-15菌株。