[发明专利]固定化漆酶微球载体及其制备方法及应用

权利要求书

1.一种制备固定化漆酶载体的方法，包括如下步骤：将聚乙烯醇微球进行磷酸化改性，得到所述固定化漆酶载体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述聚乙烯醇微球的粒径为10-1000μm；

所述聚乙烯醇微球的制备方法为反相悬浮交联法。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述反相悬浮交联法包括如下步骤：将聚乙烯醇和水于沸水浴中混匀至溶解，冷却至30-80°C后再加入液体石蜡，室温搅拌后再加入酸溶液和戊二醛的水溶液搅拌离心分离后得到所述聚乙烯醇微球；

所述聚乙烯醇、水和液体石蜡的用量比为1g：7.5-15mL：15-50mL，优选1g：10mL：20mL；

所述室温搅拌步骤中，转速为200-2000rpm，优选500rpm；搅拌桨半径为2cm；时间为0.5-24小时，优选2小时；

所述酸溶液的浓度为0.1-1mol/L，优选1mol/L；所述戊二醛的水溶液的质量百分浓度为10-100%，优选50%；

所述搅拌离心分离的搅拌步骤中，转速为200-2000rpm，优选500rpm；搅拌桨半径为2cm；时间为10-60分钟，优选30分钟；所述离心分离步骤中，转速为1000-10000rpm，优选4000rpm，离心机半径为13.5cm。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述磷酸化改性步骤包括：将所述聚乙烯醇微球浸于溶质为磷酸水溶液和脲、溶剂为水的溶液中，再水洗至中性。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述磷酸水溶液的质量百分浓度为80-98%；

所述聚乙烯醇微球、磷酸水溶液、脲和水的用量比为1g：5-50mL：1-10g：0.1-10L，优选1g：10mL：3g：1L；

所述浸泡步骤中，时间为10-3000分钟，优选30分钟。

6.权利要求1-5任一所述方法制备得到的固定化漆酶载体。

7.一种固定化漆酶的方法，包括如下步骤：将权利要求6所述固定化漆酶载体、漆酶与缓冲溶液混合静置。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述缓冲溶液的pH值为2-8，优选4.5；所述缓冲溶液选自乙酸-乙酸钠缓冲溶液、磷酸氢二钠-柠檬酸和柠檬酸-柠檬酸钠中的至少一种；

所述静置步骤中，时间为1-48小时，优选24小时。

9.权利要求7或8所得固定化的漆酶。

10.权利要求9所述固定化的漆酶在环境监测或废水处理中的应用。