[发明专利]能水解结合型胆汁酸的微生物溶液的制备方法无效

申请号：	201210175319.9	申请日：	2012-05-30
公开（公告）号：	CN102703320A	公开（公告）日：	2012-10-03
发明（设计）人：	吴宪君;干文冬;吴昱隆;宁玉蓉	申请（专利权）人：	绵阳劲柏生物科技有限责任公司
主分类号：	C12N1/00	分类号：	C12N1/00
代理公司：	暂无信息	代理人：	暂无信息
地址：	622158 四川省***	国省代码：	四川;51
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摘要：
搜索关键词：	水解结合胆汁微生物溶液制备方法
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【说明书】：

技术领域

本发明属于一种微生物溶液的制备方法，具体为能水解结合型胆汁酸的微生物溶液的制备方法。用该微生物溶液水解结合型胆汁酸变为工业上需要的游离型胆汁酸。

背景技术

各种动物胆汁中都存在着与甘氨酸和牛磺酸结合的胆汁酸盐，一直以来，人们分离工业和医药胆汁酸单体都是首先用高浓度的NaoH，在长时间高温或高压条件下，水解结合型胆汁酸变为游离型胆汁酸，如：曹荣安、李良玉、刘妍妍、范淼、张丽萍发表的“猪胆汁中胆酸皂化工艺研究”(见《食品科技》2009年第11期)。

寻找一种温和、安全的水解方法，是水解结合型胆汁酸变为游离型胆汁酸的发展方向。

已有文献还表明，胆汁酸是胆汁的重要成分，在脂肪代谢中起着重要作用。胆汁酸主要存在于肠肝循环系统并通过再循环起一定的保护作用。只有一少部分胆汁酸进入外围循环。促进胆汁酸肠肝循环的动力是肝细胞的转运系统---吸收胆汁酸并将其分泌入胆汁、缩胆囊素诱导的胆囊收缩、小肠的推进蠕动，回肠黏膜的主动运输及血液向门静脉的流入。胆汁酸在肠中通过两种机理被机体重新吸收。进餐后，胆囊在胰酶分泌素作用下发生收缩。在收缩过程中，胆囊的作用像马达，驱动肠肝循环。通常情况下，在进餐消化后30分钟内，十二指肠中的胆汁酸浓度急剧升高。在肠道中，各种形式的胆汁酸充分发挥各自的生理功能，并再次决定了自身的命运。肠道上段胆汁酸与脂类的消化吸收有关。肠道下段(即回肠及近侧结肠)胆汁酸自身发生变化：在肠内微生物作用下发生转化，并在肠黏膜中大部分以原来的或转化的形式按主动运输或被动运输机理被重新吸收。只有一小部分随食物残渣排出体外。胆汁酸盐极性越差，越容易与未吸收的纤维素或微生物结合，也越容易通过被动扩散被吸收。肠内微生物主要集中在回肠内容物及大肠内容物中。所述内容物主要指肠内待排泄物。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明抛开了常规的用NaoH皂化结合型胆汁酸的工艺，依据胆汁酸在动物体内属于肠肝循环的原理，采用一种有效方法，从肠内内容物中提取出能水解结合型胆汁酸的微生物溶液。

本发明解决其技术问题的基本思路是：依据胆汁酸在动物体内属于肠肝循环的原理，取动物回肠内容物及大肠内容物来培养提取其中的微生物，进而来水解结合型胆汁酸变成游离型胆汁酸。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种能水解结合型胆汁酸的微生物溶液的制备方法，其特征是：

取动物回肠及大肠，刮出回肠和大肠中的内容物；

在刮出的内容物中，添加内容物体积0.5-10倍的水稀释混匀，过滤除掉固体杂质，得到滤液；

按滤液体积加入0.1-0.5倍的MRS培养基，保持温度在35-42℃，培养24-72小时，得培养液；

用离心机分离培养液，得到沉淀物；

加沉淀物重量1-100倍的无菌生理盐水混悬，得到能水解结合型胆汁酸的微生物溶液；

常温保存微生物溶液，备用。

本发明中，所述内容物主要指肠内待排泄物。MRS为(肉汤)培养基。

本发明的有益效果是，这种微生物溶液能水解结合型胆汁酸变为工业上需要的游离型胆汁酸。进而还可以从鸭胆汁中用大孔树脂等方法分离其中的鹅去氧胆酸(CDCA)。