[发明专利]检测SLC26A4基因c.665G＞T突变的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测与前庭导水管扩大疾病相关的位于SLC26A4基因外显子6的c.665G>T突变的试剂盒，所述试剂盒包括：

从待测样品中提取DNA的试剂；

用于扩增样本DNA的PCR反应试剂；

对PCR扩增产物进行测序的试剂；

其中，所述扩增样本DNA的PCR反应试剂包括PCR引物，所述PCR引物扩增的目标片段包含SLC26A4基因第665位碱基。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述PCR引物为选自下述引物中的一对：

SLC26A4-6F-1:5’-GGTTTCTATCTCAGGCAAACAT-3’，

SLC26A4-6R-1:5’-ATTGTTTCTGGAATGAACAGTGACC-3’；

SLC26A4-6F-2:5’-AGGAAGGGGAGTGATAGGGT-3’，

SLC26A4-6R-2:5’-GCCCAGACTCAGAGAATGAAT-3’；

SLC26A4-6F-3:5’-CTACCAGTATTTTTGTGCTAT-3’,

SLC26A4-6R-3:5’-CAAAGTGCTGGGATTACAGG-3’;

SLC26A4-6F-4:5’-GGACCGAAAGCCACATAAAT-3’,

SLC26A4-6R-4:5’-ACCACCACACCCAGCAAAT-3’。

3.如权利要求1或2所述试剂盒，所述试剂盒用于检测位于SLC26A4基因外显子6的c.665G>T突变的方法，包括以下步骤：

1）采集待测个体的血液、体液或组织样本，提取DNA；

2）以该DNA为模板，以PCR引物进行PCR反应，得到PCR反应产物；

其中，所述PCR引物扩增的目标片段包含SLC26A4基因第665位碱基；

3）将得到的PCR反应产物进行直接测序，并将测序结果与SLC26A4正常基因的序列进行比较，确定是否存在SLC26A4基因的c.665G>T突变位点。

4.如权利要求3所述试剂盒，所述方法还进一步包括下述步骤：

4）按照正常阅读框架进行翻译以确定c.665G>T突变使氨基酸序列于222位发生错义改变，并使第222位编码的氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸（p.G222V），极性氨基酸变为了非极性氨基酸。

5.如权利要求1所述的试剂盒在用于检测前庭导水管扩大疾病中的用途。