[发明专利]一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法

权利要求书

1.一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

1）3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的发酵合成

将新鲜斜面上的菌苔转接至种子培养基培养后，转接至发酵培养基培养，得到积累了3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的发酵液；

2）真养产碱杆菌的菌体收集

将步骤1）得到的发酵液离心，弃去上清液，所得沉淀即为真养产碱杆菌的菌体；

3）3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的提取

将步骤2）得到的真养产碱杆菌的菌体冷冻，加入丙酮，离心后弃上清液，将沉淀洗涤后与EDTA溶液和次氯酸钠混合，反应后的混合液离心，弃去上清液，再将沉淀洗涤后干燥，即得到3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物。

2.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤1）中，所述种子培养基由以下配比的原料组成：牛肉膏10g/L，胰蛋白胨10g/L，酵母粉2g/L，蒸馏水定容，pH 7。

3.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤1）中，所述种子培养基培养的条件为：培养温度为30℃，摇床转速为200r/min，培养时间为16～24h。

4.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤1）中，所述发酵培养基由以下配比原料组成：葡萄糖20～30g/L，乙酰丙酸2～6g/L，酪蛋白胨1～3g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 3g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，NH₄Cl 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1g/L，柠檬酸铁铵0.0012g/L，微量元素液10mL/L，蒸馏水定容，pH 6～8。

5.如权利要求4所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于所述微量元素液由以下配比原料组成：ZnSO₄·7H₂O 10mg/L，MnCl₂·4H₂O 3mg/L，H₃BO₃30mg/L，CoCl₂·6H₂O 20mg/L，CuCl₂·6H₂O 1mg/L，NiCl₂·6H₂O 2mg/L，NaMoO₄·2H₂O 3mg/L，蒸馏水定容。

6.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤1）中，所述发酵培养基培养的接种量按体积百分比计算为发酵培养基的5%～20%，所述发酵培养基培养的条件可为：培养温度为28～32℃，摇床转速为200r/min，培养时间为70～75h。

7.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤2）中，所述离心的转速为10000～12000r/min，离心的时间为5～10min。

8.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤3）中，所述冷冻的条件于-20℃下冷冻24h；所述离心的转速可为10000～12000r/min，离心的时间可为5～10min；所述洗涤，可采用去离子水洗涤2次。

9.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤3）中，所述EDTA溶液的加入量按体积百分比为发酵液的30%～35%，所述次氯酸钠的加入量按体积百分比为发酵液的30%～35%。

10.如权利要求1所述的一种3-羟基丁酸和3-羟基戊酸共聚物的合成方法，其特征在于在步骤3）中，所述反应的条件为70℃下搅拌反应60min；所述再将沉淀洗涤，采用去离子水洗涤2次；所述干燥，可于真空干燥箱中60℃干燥12h。