[发明专利]亚全能干细胞、其制备方法及其用途有效
申请号: | 201210166714.0 | 申请日: | 2008-12-17 |
公开(公告)号: | CN102703380A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 赵宝娜 | 申请(专利权)人: | 北京汉氏联合生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;A61K48/00;A61P39/06;A61P7/06;A61P39/00;A61P37/02;A61P25/00;A61P37/06 |
代理公司: | 北京国帆知识产权代理事务所(普通合伙) 11334 | 代理人: | 李增朝 |
地址: | 100176 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 全能 干细胞 制备 方法 及其 用途 | ||
1.一种从剪断的人类脐带或胎盘制备亚全能干细胞的方法,该方法包括下列步骤:
a.无菌采集剪断的人类脐带和/或胎盘;
b.进行组织破碎,蛋白酶降解组织,过筛,分离得到原代单个核细胞;
c.使用常规的磁式细胞分选法,以CD184阴性、CD151阴性和OCT4阳性选择组合分选,从采集的单个核细胞中分选出目的细胞,分装后液氮低温冻存,建亚全能干细胞种子库。
2.根据权利要求3所述的制备亚全能干细胞的方法,其中所述的蛋白酶是胶原酶I或胰蛋白酶;根据权利要求1所述的制备亚全能干细胞的方法,其中所述的蛋白酶是胶原酶I或胰蛋白酶。
3.一种使用权利要求1或2所述方法制备的亚全能干细胞,其特征在于:其来源于剪断的人类脐带或胎盘,表达标志分子CD151和Sox-2,不表达CD34。
4.根据权利要求3所述的亚全能干细胞,其特征在于:其还表达标志分子OCT4、巢蛋白、CD90、CD29、CD13、CD166、CD105、CD44、CD73、CD49e、神经节苷脂GD2和 HLA-I;其不表达CD184、CD31、CD45、CD133、CD106、CD11b、CD271、CD41、CD61、CD42b和HLA-II。
5.根据权利要求3或4所述的亚全能干细胞,其特征在于:其在培养容器中贴壁生长,能向人体内、中、外胚层组织分化,注射至动物体内不产生畸胎瘤。
6.根据权利要求5所述的亚全能干细胞,其特征在于:所述胚层组织是血管、神经、肝脏、心肌、骨、软骨和脂肪组织。
7.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备用于基因治疗的药物中作为载体细胞的用途。
8.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备用于治疗细胞损伤或细胞衰老疾病的药物中的用途。
9.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备促进干细胞向成脂细胞、成骨细胞、成软骨、心肌细胞、神经细胞、肝细胞转化及刺激造血的药物中的用途。
10.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备用于治疗免疫调节异常疾病的药物中的用途。
11.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备用于治疗大脑损伤疾病的药物中的用途。
12.权利要求3至6中任一权利要求所述的亚全能干细胞在制备用于治疗移植物抗宿主病的药物中的用途。
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