[发明专利]一种抗肠道病毒的结合分子及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域；更具体地，本发明涉及一种抗肠道病毒的结合分子及其用途。

背景技术

肠道病毒71型(EV71)是单股正链RNA病毒，属于小RNA病毒科，肠道病毒属(Wong,S.S.et al.,2010.Human enterovirus 71and hand,foot and mouth disease.Epidemiol Infect 138,1071-1089)。EV71是导致手足口病的主要病原之一，该病目前主要在亚太地区流行。通常，EV71感染引起轻微的自限性症状，比如皮肤红疹，咽喉疼痛和发烧。但是，部分EV71感染患者能产生严重的神经症状，包括脑膜炎、类脊髓灰质炎瘫痪、脑炎和肺水肿，并最终导致死亡。

EV71感染对于生活在远东地区的儿童造成了严重的威胁。目前还没有特异性的疫苗和治疗性药物。目前已有很多工作致力于开发有效的EV71疫苗，但是，EV71疫苗的上市还需要若干年的时间。人源化鼠源单克隆抗体是一个开发预防和治疗病毒感染药物的有效方法，一种抗呼吸道合胞体病毒的人源化单抗Palivizumab就是一个成功上市的抗病毒药物。尽管目前已有数个研究小组分别用灭活病毒、活病毒或SP70多肽作为免疫原制备了鼠源抗EV71中和性单抗。但是，本领域目前还没有一种病毒抑制效果特别理想的抗EV71的单抗被开发。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗肠道病毒的结合分子及其用途。

在本发明的第一方面，提供一种结合分子，其特异性结合肠道病毒71型；并且，其抑制95%细胞病变(95%抑制率)的浓度低于1.5μg/ml(较佳地低于1.3μg/ml；更佳地低于1μg/ml；更佳地低于0.5μg/ml；更佳地低于0.4μg/ml)。

在一个优选例中，所述的结合分子特异性结合肠道病毒71型的VP1蛋白；更佳地，其结合于VP1蛋白的线性表位。

在另一优选例中，所述的结合分子通过肠道病毒71型的病毒样颗粒免疫动物(如小鼠)、获取动物脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞，由杂交瘤细胞分泌获得。

在另一优选例中，所述的病毒样颗粒通过共表达P1和3CD制备获得。

在另一优选例中，所述结合分子包含SEQ ID NO:3所示重链CDR1区、SEQ ID NO:4所示重链CDR2和SEQ ID NO:5所示重链CDR3区。

在另一优选例中，所述结合分子包含SEQ ID NO:6所示轻链CDR1区、SEQ ID NO:7所示轻链CDR2和SEQ ID NO:8所示轻链CDR3区。

在另一优选例中，所述的结合分子包含重链可变区，所述的重链可变区具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含轻链可变区，所述的轻链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含重链可变区和轻链可变区，其重链可变区和轻链可变区分别具有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含重链恒定区和轻链恒定区，其重链恒定区和轻链恒定区分别具有SEQ ID NO:16中第138-461和SEQ ID NO:18中第133-238所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子是人单克隆抗体，由选自以下的杂交瘤细胞株制备获得：

在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC No.C201232的杂交瘤细胞株(D5)；

在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC No.C201233的杂交瘤细胞株(H7)；或

在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC No.C201234的杂交瘤细胞株(C4)。

在本发明的另一方面，提供编码所述的结合分子的核酸分子。

在本发明的另一方面，提供一种表达载体，所述表达载体中含有所述的结合分子的核酸。

在本发明的另一方面，提供一种宿主细胞，所述宿主细胞中含有所述的表达载体；或其基因组中整合有所述的结合分子的核酸。

在本发明的另一方面，提供所述的结合分子在制备用于诊断、治疗和/或预防肠道病毒71型感染的试剂、试剂盒或药物中的用途。

在一个优选例中，所述的试剂或药物还用于诊断、治疗和/或预防手足口病。