[发明专利]一种用于快速检测登革热病毒IgG、IgM型抗体的胶体金试纸条

说明书

技术领域，

本发明属于生物检测领域，涉及一种医用检测耗材，具体涉及一种用于快速检测登革热病毒IgG、IgM型抗体的胶体金试纸条。

背景技术

登革热是登革热病毒引起、伊蚊传播的一种急性传染病。临床特征为起病急骤，高热，全身肌肉、骨髓及关节痛，极度疲乏，部分患者有皮疹、出血倾向和淋巴结肿大。登革热为全球最严重的由蚊虫传播的病毒性疾病。该病毒主要是通过埃及伊蚊传播，超过100个国家报告过登革热爆发，有2.5亿人生活在登革高感染区，每年会发生5000万到1亿例登革出血热，200000-500000例登革感染者最终发展为登革出血热，平均有5%的登革出血热患者会死亡。

登革热病毒是小型黄病毒，属于黄热病毒属，按流行病学分类属虫媒病毒B组，血清学上分为1,2,3，4共四个血清型。登革热病毒能够引起一系列临床症状，包括有生命危险的失血性休克综合征和较少见的伴有肝衰与脑病的急性肝炎。感染登革热病毒轻则突然发热、剧烈肌肉疼痛、骨关节痛，重则广泛出血、迅速休克。

免疫胶体金技术(Immunogold labelling techique)是上世纪80年代继荧光素、放射性同位素和酶三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。该技术主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，形成肉眼可见的红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。快速诊断试纸条是20世纪90年代以来在单克隆抗体技术、胶体金免疫层析技术和新型层析材料基础上发展起来的一项新型体外诊断技术，近年来发展迅速，在生物医学领域特别是医学检验中得到了广泛应用。该技术主要是将特异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维膜上，胶体金标记试剂吸附在结合垫上，当待测样品加到试纸条一端的样品垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体区域时，待测物金标试剂复合物与之发生特异性结合而被截留，胶体金标记聚集在检测带上，可通过目测得到直观的显色结果。而游离的标记物则越过检测带，从而达到与检测物自动分离的目的。

抗体捕获法（亦称反向间接法）ELISA，主要用于血清中某种抗体亚型成分的测定。其原理是将抗原固化在基质上，加入含抗体的杂交瘤培养上清，洗去未结合的抗体，结合于抗原上的抗体可由标记有荧光素、放射性核素或一些酶的兔抗小鼠免疫球蛋白抗体识别。

常用的抗体检测方法有：ELISA法和RT-PCR法。但这些检测技术需要特殊的仪器设备，并且需要专业技术人员在专业的实验室进行检测，操作复杂，耗时长，不适宜于现场即使检测。

目前,现有技术中还没出现能实现血清型为1,2,3,4的登革热病毒IgG和IgM抗体同时检测并且具有简便、快捷、准确特点的仪器，因此对于登革热病毒IgG和IgM抗体的检测，耗时较长，检测过程繁琐。

发明内容

为解决上述领域的需求和空白，本发明旨在提供一种用于快速检测登革热病毒IgG、IgM型抗体的胶体金试纸条，本发明试纸条采用抗体捕获法原理和免疫胶体金技术相结合快速检测人血清、血浆或全血中的登革热病毒IgG、IgM型抗体，能定性检测血清型1、2、3，4型四种登革病毒的IgG、IgM抗体，用于临床实验室对具有持续发烧的登革感染症状或接触史的患者的辅助性诊断。本发明试纸条操作简单，拿来即用，能够满足不同层次人员的需要，容易普及到基层社区医院，以符号显示结果，摆脱了对设备、仪器、人员及贮存和运输环境的特殊要求，并且具有快速、简便、灵敏、准确、特异的特点，同时本发明用样量少，节省资源，储存条件宽泛，可同时一次性判读出登革热病毒IgG或IgM型抗体的阳性结果。

一种用于快速检测登革热病毒IgG、IgM型抗体的胶体金试纸条，在高度方向上包括基板支撑层、反应试剂载体吸附层，所述反应试剂载体吸附层固定在所述基板支撑层上；

所述反应试剂载体吸附层从加液端到手持端依次设有样品纤维垫，金标纤维结合垫，纤维素药膜，手持端吸水材料垫；

在所述样品纤维垫、金标纤维结合垫和手持端吸水材料垫上覆盖有保护膜层，

所述纤维素药膜从加液端到手持端依次设有质控线C、检测线T₁，T₂，所述质控线C和检测线T₁，T₂相互平行且与所述胶体金试纸条长度方向相垂直，