[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其在降解17β-雌二醇中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株枯草芽孢杆菌及其在降解17β-雌二醇中的应用。

背景技术

雌激素（英文名称：estrogen；estrin；oestrogen），是由脊椎动物的卵巢、睾丸、胎盘或肾上腺皮质所产生的十八碳固醇类激素。绝大部分哺乳动物的主要雌激素是17β-雌二醇（E2），其他重要的雌激素有雌三醇和雌酮。

天然雌激素广泛分布在废水、动物排泄物、地表水以及地下水中。天然雌激素在很低浓度下即显示出很强的内分泌干扰效应，如E2在1-10ng/L时就会使一些野生雄性鱼类出现雌化现象。同其他污水相比，畜禽养殖业废水中雌激素类物质的含量非常高，雌激素总量可达到1000-21000ng/L，其中E2在养猪废水中的浓度可达到1000-16000ng/L，是城市污水含量的10倍以上。

发明内容

本发明的目的是提供一株枯草芽孢杆菌及其在降解17β-雌二醇中的应用。

本发明提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CHS，已于2012年05月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），保藏号为CGMCCNo.6128。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CHS CGMCC No.6128简称枯草芽孢杆菌CHS。

所述枯草芽孢杆菌CHS可用于降解17β-雌二醇。应用所述枯草芽孢杆菌CHS降解17β-雌二醇时，反应体系的pH值可为6.25-8.75（如6.25-7.40或7.40-8.75）。

应用所述枯草芽孢杆菌CHS降解17β-雌二醇时，反应体系的氨氮浓度可为0.6-10mg/L（如0.6-2mg/L或2-10mg/L）。所述氨氮具体是由(NH₄)₂CO₃或NH₄HCO₃提供的。

本发明还保护一种制备降解17β-雌二醇的产品的方法，包括如下步骤：将所述枯草芽孢杆菌CHS接种至含有氨氮的LB培养基中，37℃振荡培养12-36小时，然后将培养体系冻干，得到降解17β-雌二醇的产品。

所述含有氨氮的LB培养基可为含有(NH₄)₂CO₃的LB培养基或含有NH₄HCO₃的LB培养基。所述LB培养基的pH值具体可为8.25。所述接种后，所述枯草芽孢杆菌CHS的初始浓度具体可为10⁴cfu/mL。完成所述振荡培养后，所述培养体系中所述枯草芽孢杆菌CHS的浓度具体可为10⁸-10⁹cfu/mL。所述含有(NH₄)₂CO₃的LB培养基具体可为含有10mg/L(NH₄)₂CO₃的LB培养基。所述含有NH₄HCO₃的LB培养基具体可为含有10mg/LNH₄HCO₃的LB培养基。所述振荡具体可采用200r/min的转速。

以上任一所述方法制备得到的降解17β-雌二醇的产品也属于本发明的保护范围。

所述产品可用于降解17β-雌二醇。

所述枯草芽孢杆菌CHS或所述产品在可用于降解禽畜废水。

本发明的发明人采用生物工程技术手段，从畜禽养殖废水生物处理SBR反应器的活性污泥中分离到一株能够高效降解17β-雌二醇的菌株。经形态、培养特征及生理生化实验结果观察，鉴定出该菌为为枯草芽孢杆菌。该菌株对17β-雌二醇具有很高降解效果。该菌在畜禽养殖废水的高氨氮浓度溶液和高pH溶液的条件下，依然表现出良好的降解能力。实际应用中，可将该菌株扩大培养制成成品菌悬液或粉剂，投放于实际的废水体系中。本发明具有成本低、操作简单、降解效率高、适应性强等优点。

本发明的优点及效果：适用于畜禽养殖废水高氨氮高pH的特性；（2）具有成本低、操作简单、降解效率高的优点；（3）环境相容性好，减少使用化学试剂，避免二次污染；（4）在天然雌激素类物质污染环境的生物修复方面具有良好的应用前景。

附图说明

图1为实施例2中各个样本中17β-雌二醇的浓度。

图2为实施例3中各个样本中17β-雌二醇的浓度。