[发明专利]细胞质抗坏血酸过氧化物酶作为植物抗旱标记物的应用无效
申请号: | 201210162614.0 | 申请日: | 2012-05-21 |
公开(公告)号: | CN103424549A | 公开(公告)日: | 2013-12-04 |
发明(设计)人: | 孙卫宁;黄蔚 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞质 抗坏血酸 过氧化物 作为 植物 抗旱 标记 应用 | ||
1.细胞质抗坏血酸过氧化物酶的用途,用于作为鉴定禾本科植物抗旱能力的标志物。
2.如权利要求1所述的用途,其特征在于,所述的细胞质抗坏血酸过氧化物酶是抗坏血酸过氧化物酶1和抗坏血酸过氧化物酶2。
3.如权利要求2所述的用途,其特征在于,所述的抗坏血酸过氧化物酶1选自:分子量26.5kD,等电点5.15;分子量27.2kD,等电点5.3;和/或分子量27.8kD,等电点5.33的抗坏血酸过氧化物酶1;或
所述的抗坏血酸过氧化物酶2选自:分子量29kD,等电点4.8;分子量29.52kD,等电点4.92;和/或分子量30kD,等电点4.98的抗坏血酸过氧化物酶2。
4.一种鉴定具有抗旱能力的禾本科植物的方法,包括:
对禾本科植物进行干旱处理,分析干旱处理前后的植株中细胞质抗坏血酸过氧化物酶的表达情况;若细胞质抗坏血酸过氧化物酶被干旱处理后表达显著升高,则该禾本科植物是具有抗旱能力的植物。
5.如权利要求4任一所述的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)对禾本科植物进行干旱处理,获得经干旱处理的植株;以未经干旱处理且其它培养方法相同的禾本科植物作为对照;
(2)分析经干旱处理的植株中细胞质抗坏血酸过氧化物酶的表达情况;若细胞质抗坏血酸过氧化物酶的表达在统计学上高于对照,则该禾本科植物是具备抗旱能力的植物。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的细胞质抗坏血酸过氧化物酶是抗坏血酸过氧化物酶1和抗坏血酸过氧化物酶2。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,采用双向电泳以及Western印迹的方法来鉴定具备抗旱能力的植物。
8.如权利要求4-7任一所述的方法,其特征在于,针对以下分子量和等电点所代表的印迹点分析抗坏血酸过氧化物酶1的表达:分子量26.5kD,等电点5.15;分子量27.2kD,等电点5.3;和/或分子量27.8kD,等电点5.33;或
针对以下分子量和等电点所代表的印迹点分析抗坏血酸过氧化物酶2的表达:分子量29kD,等电点4.8;分子量29.52kD,等电点4.92;和/或分子量30kD,等电点4.98。
9.如权利要求4-7任一所述的方法,其特征在于,所述的干旱处理是在禾本科植物穗发育时期和/或生殖生长期断水干旱处理。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的断水干旱处理包括:待禾本科植物生长至幼穗分化期,进行断水处理,断水至叶片卷曲,胁迫至剑叶叶尖发黄,取样用于分析;或
幼穗分化的中期开始断水处理、断水至叶片开始卷曲,胁迫至剑叶叶尖发黄,取样用于分析。
11.一种鉴定具有抗旱能力的禾本科植物的方法,包括:分析禾本科植物中细胞质抗坏血酸过氧化物酶的表达情况;若表达量低于标杆植物,则该禾本科植物是具有抗旱能力的植物;若表达量高于标杆植物,则该禾本科植物是具有旱敏的植物;所述的标杆植物是抗旱指数0.7-1.0的植物。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述的细胞质抗坏血酸过氧化物酶是抗坏血酸过氧化物酶1或抗坏血酸过氧化物酶2;
若抗坏血酸过氧化物酶1表达量低于标杆植物的表达量,则该禾本科植物是具有抗旱能力的植物;若抗坏血酸过氧化物酶1表达量高于标杆植物的表达量,则该禾本科植物是具有旱敏的植物;
若抗坏血酸过氧化物酶2表达量低于标杆植物的表达量,则该禾本科植物是具有抗旱能力的植物;若抗坏血酸过氧化物酶2表达量高于标杆植物的表达量,则该禾本科植物是具有旱敏的植物。
13.一种鉴定具有抗旱能力的禾本科植物的试剂盒,其中包括:
特异性结合细胞质抗坏血酸过氧化物酶的抗体;
蛋白双向电泳试剂;
Western印迹试剂;和/或
说明鉴定具有抗旱能力的禾本科植物的方法的使用说明书。
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