[发明专利]大豆生育期e1-fs基因及其编码蛋白

说明书

技术领域

本发明涉及大豆生育期e1-fs基因及其编码蛋白。

背景技术

E1基因位于着丝点附近，自Bernard（1971）年报道以来，人们一直没有克隆出其功能基因。由于该基因位于近着丝点(pericentromeric region)，遗传重组率较低，不利于采用图位克隆法克隆出该基因，在发明专利（一种大豆生育期E1基因及其编码蛋白，专利申请号为：201210112662.9）中，公布出E1基因序列及其相应的蛋白序列后，证明大豆生育期E1基因具有强烈抑制大豆开花的生理功能。其蛋白质序列虽然并不能鉴定出B3结构域，但是与B3结构域基因具有远缘的关系。B3结构域基因是一类较为保守的植物特有的转录因子，一般只有100-120氨基酸，常与其他结构域共同起作用。B3结构域中含有与DNA相结合的特殊位点，一般与DNA分子的大沟起作用。在含有B3结构域的蛋白质对抗逆性反应、植物的生长与发育等诸多方面起重要作用。同时，E1基因具有一个核定位信号，其特征为亲核蛋白一般都含有的能保证整个蛋白质能够通过核孔复合体被运到细胞核内的特殊的短肽氨基酸序列。在大豆栽培品种中，其E1基因的突变如何影响着大豆生育期（开花期及成熟期）是一个非常重要的科学问题，目前还没有在分子水平上的相关研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供大豆生育期e1-fs基因及其编码蛋白。

本发明的大豆生育期e1-fs基因的基因序列如序列表Seq ID No：1所示。

本发明的大豆生育期e1-fs基因的编码蛋白的氨基酸序列如序列表Seq ID No：2所示。

本发明的大豆生育期e1-fs基因是大豆生育期E1基因（发明专利申请号：201210112662.9）的突变型基因。

本发明的有益效果：

本发明是在克隆出大豆生育期E1基因（发明专利申请号：201210112662.9）的基础上，进一步对E1基因序列进行深入系统的研究。由于在大豆中具有典型的B3基因结构域基因，本基因是代表一类新型的基因家族，我们已证实E1基因可以代表着E1位点的功能，即具有抑制大豆开花的功能。本发明对不同品种及近等基因系中E1基因序列进行了研究，并确定了e1-fs基因，其对大豆生育期关系密切。

e1-fs基因是在大豆生育期E1基因（发明专利申请号：201210112662.9）核苷酸序列48bp处发生了单碱基缺失，在AA 16至41之间形成移码（frameshift），在第42位形成了终止子（见序列表Seq ID No：2）。细胞定位研究发现，该基因因移码而造成了没有任何信号出现在细胞核或细胞质中。具有e1-fs基因的品种表现为开花特早，在长日照条件下具有e1-fs基因的品种或品系与短日照条件下的开花天数相当，大约为30天左右，说明具有e1-fs品种几乎丧失了对光周期的敏感性。坂本早生(Sakamotowase)及其衍生品种是具有e1-fs基因型的典型品种。

附图说明

图1为e1-fs基因电泳图，其中，1号为铁荚四粒豆，2号为长农14，3号为Kariyutaka，4号为铁荚子，5号为长农18，6号为坂本早生(Sakamotowase)，7号为小金黄，8号为长农4；

图2为GFP未融合e1-fs基因的瞬时表达载体结构示意图；

图3为GFP融合e1-fs基因的瞬时表达载体结构示意图；

图4为GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜GFP通道下的亚细胞定位影像图；

图5为GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜chlorophyll通道下的亚细胞定位影像图；

图6为GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜明视野下的亚细胞定影像位图；

图7为GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜GFP通道、chlorophyll通道与明视野融合后的亚细胞定位影像图；

图8为GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜GFP通道下的亚细胞定位影像图；

图9为GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜chlorophyll通道下的亚细胞定位影像图；

图10为GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜明视野下的亚细胞定位影像图；

图11为GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦显微镜GFP通道、chlorophyll通道与明视野融合后的亚细胞定位影像图；