[发明专利]一种生产修饰胞苷素工程菌的构建及其应用无效
| 申请号： | 201210161901.X | 申请日： | 2012-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN103421726A | 公开（公告）日： | 2013-12-04 |
| 发明（设计）人： | 王玉成;高玉忠;王理想;王友志;杨凯;曹再林;张春来;靳长娟 | 申请（专利权）人： | 徐州诺特化工有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/38;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 221011 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生产 修饰 胞苷素 工程 构建 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种表达侧链为-C4H8ClO9的氮取代胞苷素的不吸水链霉菌高活性工程菌，其特征是包含编码透明颤菌血红蛋白基因vhb和卤代酶基因。
2.根据权利要求1所述的方法，其中卤代酶基因来自红树林土壤放线菌、或稀有海洋放线菌。
3.根据权利要求1所述的方法，其中编码透明颤菌血红蛋白基因vhb所用启动子为红霉素抗性基因启动子(ermEp)。
4.一种利用权利要求1所述的工程菌发酵制备侧链为-C4H8ClO9的氮取代胞苷素的方法，其制备方法包括：工程菌在培养基中发酵，发酵产物分离提纯得到侧链为-C4H8ClO9的氮取代胞苷素。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征是发酵的培养基为：玉米粉15～25g、豆饼粉20～35g、葡萄糖15～25g、淀粉8～12g、氯化铵1～5g、碳酸钙1～5g，硫酸镁0.1～0.5g，硫酸亚铁0.1～0.5g，氯化钠0.1～0.5g，磷酸氢二钠0.1～0.5g，加自来水至1000mL。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征是发酵的培养条件为：摇床震荡培养，转速为150～250转/分钟，发酵温度：25～35℃。
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