[发明专利]一株产蓝色素菌株及色素提取方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物工程技术领域，具体涉及一株分离自盐城大丰市金海农场的假单胞菌NJYS-02（Pseudomonadaceae sp.NJYS-02）及该菌株发酵和提取蓝色素的方法。 

背景技术

色素是指能够使被媒染物着色的物质，也称为着色剂，可用于改善物品和食品色泽的物质，被广泛的应用在纺织、建筑、食品、生物、医药卫生、化妆品、日用工业品、饲料等行业领域， 

色素通常分为合成色素和天然色素两大类。随着社会的发展，人们对生活质量要求的不断提高，色素安全问题也日益受到重视。由于化学合成色素具有色泽鲜艳、着色力强、性质稳定和价格低廉，被广泛应用。但化学合成色素，很多是从煤焦油中提取或以苯、甲苯、萘、苯胺等芳烃类化合物为原料进行合成，都有程度不同的毒性，特别是偶氮型色素，有可能在体内通过代谢成为致癌物质，还有一些色素合成的过程中，可能被一些重金属及其他有害物质污染。因此，近年来合成色素的安全性问题被世界各国关注。与之相比，天然色素安全性高，还有一定的营养价值、药理作用，在世界范围内受到积极开发。 

由于蓝色是三原色之一，它可用于多种色调的调配。但由于红、黄品系的天然色素来源较多，而蓝色素稀少，使得天然蓝色素在国内外市场上均供不应求，因此研究开发天然蓝色素在色素相关领域中具有极大的现实意义和诱人的市场前景。 

天然蓝色素的自然来源也非常有限，无机天然蓝色素主要来源于自然蓝矾 矿，有机天然蓝色素则主要来源于植物和微生物材料。动植物材料为原料的蓝色素制取，容易受到季节、气候、产地等因素的制约，从而使得天然蓝色素的产量非常有限，因而价格昂贵，难以普及应用。而自然界中微生物产色素种类繁多，且微生物生长快、易培养、便于工业化生产，不受资源、环境、时间和空间的限制，因而具有利用动植物来源的材料生产天然色素所无法比拟的优越性，，因此利用微生物生产天然色素的技术具有广阔的应用前景。 

已报告的能产蓝色素的微生物如链霉菌（Streptomyces sp.）、假单胞菌（Pseudomonadaceae sp.）、假交替单胞菌（Pseudoalteromonas sp.）、杜檊氏菌（Duganella sp.）、出芽短梗霉（Aureobasidium sp.）、紫色非硫细菌等可利用培养基质在生长过程中产生各不相同的蓝色素，另有一些基因工程菌株可以产生靛蓝色素。但目前国内有报告微生物产蓝色素的菌株主要是链霉菌，培养基配方较复杂，且需用大型发酵设备。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有合成色素的诸多问题和天然色素供应的不足，提供一种可产蓝色素的假单胞菌NJYS-02（Pseudomonadaceae sp.NJYS-02）及该菌株发酵液和提取蓝色素的方法和应用。 

本发明所涉及的菌株是自盐城大丰市金海农场的假单胞菌NJYS-02（Pseudomonadaceae sp.NJYS-02），菌株于2012年5月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCG No.6071。保藏地点为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。 

本发明还公开了如上所述的假单胞菌NJYS-02产蓝色素的方法，将假单胞菌NJYS-02（Pseudomonadaceae sp.NJYS-02）按2%接种量接种到以20%的马铃薯汁 添加1.5%的葡萄糖的培养基中，pH 5.0-6.0时，28℃静置培养3天后，发酵液4000rpm离心15分钟后弃上清，菌体用超声波破碎细胞，乙醇提取后，旋转蒸发浓缩后得到纯化的蓝色素。 

本发明所涉及菌株假单胞菌NJYS-02（Pseudomonadaceae sp.NJYS-02），小鼠灌胃急性毒性试验证明该菌株所产蓝色素为实际无毒类。 

与现有技术相比，本发明的优点是： 

1.利用马铃薯和葡萄糖等原料为发酵基质发酵，产生天然蓝色素，满足市场需求； 

2.通过静置培养，就可大规模发酵蓝色素，无需大型发酵设备，节省大量动力和人工费用。 

3.菌株所产的天然蓝色素具有无毒、安全性高的特点，可应用于医疗、食品、化妆品、纺织等行业。 

4.本发明旨在利用微生物资源采用发酵工程技术将农业资源转化为蓝色素，解决自然源蓝色素紧缺问题，生产出安全的蓝色素。 

附图说明：

图1是本发明菌株在显微镜下1000倍观察的个体形态图。 

图2是本发明菌株的菌落图 

图3是本发明菌株的16S rRNA PCR产物电泳图