[发明专利]一种促进细胞在气管脱细胞基质支架内部生长的方法

说明书

技术领域

 属生物医药，特别涉及人工组织工程气管技术领域。

背景技术

长段气管缺损的重建是临床尚待解决的难题，组织工程气管因其生物相容性较好，免疫排斥反应少，生物活性好，还能够在体外预血管化以及相关组织细胞再生培养等多方面的优点，而被认为是最理想、最符合生理要求的气管替代物。

同种异体气管脱细胞基质支架具有极佳的生物相容性、天然的细胞生存环境以及好的生物力学性能，其作为组织工程气管支架具有很强的优势和应用前景。2008年西班牙学者Macchiarini采用脱氧胆酸钠和核酸酶处理的气管脱细胞基质构建的组织工程气管成功地为1例患有终末期支气管软化症的30岁女性进行了左主支气管移植，这是基于脱细胞基质气管组织工程最今人鼓舞的研究成果。

脱细胞气管基质作为气管组织工程支架有诸多优点，但其最主要的缺陷是组织结构致密，软骨细胞无法长入脱细胞基质支架的内部，导致气管壁软骨再生不全。软骨细胞无法在脱细胞基质支架内部生长的结局是组织工程气管移植后随着基质的降解，移植段气管软化塌陷而导致长期组织修复失败。

发明内容

本发明提供基质支架不会塌陷的一种促进细胞在气管脱细胞基质支架内部生长的方法。

本发明采取的技术方案：

一种促进细胞在气管脱细胞基质支架内部生长的方法，其方案是：对气管脱细胞基质支架，由激光微孔均匀穿刺，围绕激光微孔种植软骨细胞。

实施本发明的积极效果：

本发明在不破坏气管细胞外基质结构的基础上对其进行激光微孔处理，从而制备出具有合适孔隙的激光微孔气管脱细胞基质支架，使软骨细胞可以沿激光微孔深入生长到支架的内部，从而解决软骨细胞无法在基质内深入生长的问题，为社会提供理想的组织工程气管创造了条件。

具体实施方式

现对本发明作进一步说明

一种防止气管脱细胞基质支架软化塌陷的方法，其特点是：对气管脱细胞基质支架，由激光微孔均匀穿刺；并由以下操作实施：

1）制备气管脱细胞基质支架，

2）对气管脱细胞基质支架从外表面作激光微孔均匀穿刺，

3）将激光微孔穿刺后的脱细胞基质置入曲拉通溶液中震荡，去除微孔周边变性组织，

4）在该支架材料表面，围绕激光微孔种植软骨细胞。

所述制备气管脱细胞基质支架，是由脱氧胆酸钠(DOA)联合核酸酶，采用消化法制备气管脱细胞基质。

所述激光微孔是用CO2激光加孔机对其进行打微孔处理，初始设置参数：输出功率25W，波长10.6μm，功率密度10⁶W/cm²，激光光斑直径为0.2mm，孔间距为1.0mm。

所述曲拉通溶液其浓度是1%，震荡时间为6小时。