[发明专利]哈茨木霉T28抑菌成分防治致病疫霉菌制剂的制备方法无效
| 申请号： | 201210160696.5 | 申请日： | 2012-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN102696687A | 公开（公告）日： | 2012-10-03 |
| 发明（设计）人： | 宋瑞清;杨立宾 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学 |
| 主分类号： | A01N63/04 | 分类号： | A01N63/04;A01P3/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 哈茨木霉 t28 成分 防治 致病 霉菌 制剂 制备 方法 | ||
1.一种哈茨木霉T28抑菌成分防治致病疫霉菌制剂的制备方法，其特征在于：
哈茨木霉T28发酵液的制备：
（1）采用改良马铃薯葡萄糖(PD)液体培养基，培养基按比例组成为：马铃薯100g-200g、葡萄糖10g-20g、KH2PO42g-3g、MgSO41g-2g、水500ml-1000ml，发酵液pH5.0-6.0，进行液体发酵培养5-10天，接种量为发酵液体积的1%-2%，装液量为锥形瓶容积的35%，发酵培养条件为，温度25℃-30℃，摇床转数125r/min-150r/min；
（2）哈茨木霉T28发酵液中抑菌活性成分提取：将培养5-10天的哈茨木霉菌株T28发酵液用无菌纱布过滤，置于冷冻离心机中，在之后用0.22μm的滤头过滤，将滤液200ml加入800ml95%的分析乙醇浸提3h-5h，水浴加热至50℃，搅拌、加速溶解，将滤液和乙醇的混合溶液浓缩至200ml，加入沸点为60℃的石油醚800ml浸提2h-5h并用分液漏斗分离两部分溶剂，将水层与1000ml乙醚混合，常温下静止放置2h-5h，分液漏斗过滤，将水层与1000ml乙酸乙酯混合，在常温下静止放置2h-5h，分液漏斗过滤，弃水层，将乙酸乙酯层以50℃真空旋转蒸发浓缩，直至液体全部蒸发干，圆底烧瓶底部有黄褐色粉末挂壁；得到抑菌活性成分；
（3）哈茨木霉T28发酵液中抑菌成分制剂的制备：将抑菌活性成分用10%吐温80溶液溶解，恢复为原发酵液过滤液体积的1/10。
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